示差遠心分離と密度勾配遠心分離の違い

主な違い - 差圧遠心法と密度勾配遠心法

遠心分離は、固定軸を中心としたサンプルの回転によって遠心力 (g) が生じる分離方法です。サンプル中の粒子または細胞は、遠心力によって液体媒体を通って押し下げられます。沈降速度は、粒子または細胞の密度とサイズによって決まります。密度とサイズが異なる粒子または細胞の沈降速度は異なるため、遠心分離のある時点でそれらは互いに物理的に分離されます。示差遠心分離と密度勾配遠心分離は、遠心分離の 2 つの主要なタイプです。 主な違い 分画遠心分離と密度勾配遠心分離の違いは、分画遠心分離ではサイズに基づいて分画が行われるのに対し、密度勾配遠心分離では密度に基づいて分画が行われることです。

対象となる主な分野

1.分画遠心法とは
– 定義、事実、プロセス
2.密度勾配遠心法とは
– 定義、事実、プロセス
3.微分遠心分離と密度勾配遠心分離の類似点
– 共通機能の概要
4.微分遠心分離と密度勾配遠心分離の違いは何ですか
– 主な違いの比較

重要な用語:密度、密度勾配遠心分離、分画遠心分離、分画ペレット化、平衡遠心分離、等密度遠心分離、レートゾーン遠心分離、サイズ

分画遠心法とは

分画遠心分離は、遠心分離の最も単純な形式を指します。 差別化ペレットとしても知られています .細胞の成分は分画遠心分離によって分離することができます。分画遠心法は、溶液中の粒子のサイズに基づいています。したがって、異なるサイズの粒子は、遠心分離中に異なる速度で沈殿します。大きな粒子は、小さな粒子よりも速く沈降します。遠心力を大きくすることで沈降速度を上げることができます。示差遠心法は 図 1 に示されています .

図 1:分画遠心法

理想的には、分画遠心法を使用して細胞を回収するか、組織ホモジネートから粗細胞分画を生成します。例えば、肝臓ホモジネートは、核、ミトコンドリア、リソソーム、および膜小胞を含む場合があります。肝臓ホモジネートを低速で短時間遠心分離すると、大きな核がペレットに沈殿します。より高い遠心力が使用されると、ミトコンドリアもペレットに沈殿します。生物学的サンプルは均質であるため、沈降物は常に汚染されます。

密度勾配遠心分離とは

密度勾配遠心法とは、セシウム塩またはスクロースの溶液中で物質を濃縮する分離方法を指します。浮力密度に基づく粒子の分別に関与しています。セシウム塩またはショ糖溶液は密度勾配と呼ばれます。密度勾配遠心分離には、レートゾーン遠心分離と等密度遠心分離の 2 種類があります。

レー​​トゾーン遠心法

レートゾーン遠心分離中、サンプルは密度勾配の上に狭いゾーンとして層状になります。粒子は、その密度に基づいて遠心力の下で異なる速度で移動します。実際の沈降速度は、主に粒子のサイズと質量に依存します。粒子の密度が密度勾配よりも高いため、すべての粒子がペレットを生成します。密度勾配遠心法は図 2に示されています。

図 2:密度勾配遠心法

等密度遠心分離

等密度遠心分離は均一溶液から始まります。遠心力の下で、粒子はその密度が密度勾配に似るまで移動します。したがって、等密度遠心分離は、浮力または平衡遠心分離としても知られています。 .生物学的粒子は、密度勾配の浸透圧に依存します。したがって、勾配培地には、細胞またはオルガネラと同様の浸透圧が含まれている必要があります。

微分遠心分離と密度勾配遠心分離の類似点

• 分画遠心法と密度勾配遠心法は、2 種類の遠心法です。
• 微分遠心分離と密度勾配遠心分離の両方が、粒子または細胞の物理的特性に基づく分離に関与しています。

差圧と密度勾配遠心分離の違い

定義

分画遠心法: 分画遠心法とは、細胞の構成要素が、遠心力に応じた遠心分離機での密度に基づいて分離される分離方法を指します。

密度勾配遠心法: 密度勾配遠心法とは、物質がセシウム塩またはスクロースの溶液中で濃縮される分離方法を指します。

分離

分画遠心法: 分別遠心分離では、粒子のサイズに基づいて分離が行われます。

密度勾配遠心法: 分離は、密度勾配遠心法で粒子の密度に基づいて行われます。

分子の種類

分画遠心法: 分画遠心法は、細胞、オルガネラ、または高分子を分離するために使用されます。

密度勾配遠心法: 密度勾配遠心分離は、分子または粒子の分離に使用されます。

サンプルの種類

分画遠心法: 均質化された臓器は、分画遠心分離のサンプルとして使用されます。

密度勾配遠心法: 均質化した溶液を密度勾配遠心分離のサンプルとして使用します。

砂糖溶液

分画遠心法: 分画遠心法では糖液を使用しません。

密度勾配遠心法: 密度勾配遠心分離では、スクロースまたは任意の糖溶液が使用されます。

方法の容易さ

分画遠心法: 分画遠心法は使いやすいです。

密度勾配遠心法: 密度勾配遠心法は使いにくいです。

汚染

分画遠心法: 分画遠心法ではコンタミネーションが発生しません。

密度勾配遠心法: 密度勾配遠心分離では、常に何らかの汚染が発生する可能性があります。

結論

分画遠心法と密度勾配遠心法は、粒子を分離するために使用される遠心分離の 2 つの方法です。差動遠心分離は、粒子をそのサイズに基づいて分離します。ただし、密度勾配遠心分離は粒子を分離します。微分遠心法と密度勾配遠心法の主な違いは、各タイプの遠心分離法が基づいている物理的特性のタイプです。

参照:

画像提供:

1. Thomasione による「Differentielle zentrifugation」 – 自身の作品 (元のテキスト:selbst erstellt) (パブリック ドメイン)、Commons Wikimedia 経由
2. 「密度勾配」元のアップロード者は、英語版ウィキブックスの Mlw3559 でした – en.wikibooks から転送コモンズへ。 (CC BY-SA 2.5) コモンズ ウィキメディア経由