1。原則:
*ビューレット試験は、タンパク質に見られるペプチド結合を伴うアルカリ溶液中の銅イオン(Cu²⁺)間の反応に依存しています。
*ペプチド結合は、タンパク質を構成するアミノ酸間の結合です。
*銅イオンがペプチド結合に結合すると、それらは特定の波長で光を吸収する複合体を形成し、明確な色の変化を生成します。
2。手順:
* 少量の未知のサンプル(液体または固体)を試験管に追加します。
* サンプルにビューレット試薬を数滴加えます。 Biuret Reagentは、硫酸銅と水酸化ナトリウムを含む溶液です。
* 試験管の内容物を優しく混ぜます。
* 色の変化を観察します。
3。結果の解釈:
* 肯定的な結果: 溶液がバイオレットまたは紫色に変わる場合 、タンパク質の存在を示します。
* 負の結果: 溶液が青色のままであるか、有意な色の変化がない場合、タンパク質の欠如を示唆しています。
4。制限:
*ビューレット試験はタンパク質に特異的ではなく、ペプチドやその他の分子などのペプチド結合を含む化合物に肯定的な結果をもたらすこともあります。
*このテストは、非常に低い濃度のタンパク質を検出するのに十分な敏感ではない場合があります。
5。その他のタンパク質検査:
Biuretテストは広く使用されていますが、次のような他のタンパク質テストも利用できます。
* ニンヒドリン検査: タンパク質の構成要素であるアミノ酸の存在を検出します。
* Xanthoproteicテスト: チロシンやトリプトファンなどの芳香族アミノ酸の存在を検出します。
* Millonのテスト: 多くのタンパク質に含まれるアミノ酸であるチロシンの存在を検出します。
テストの選択は、調査対象の特定のタンパク質と、望ましいレベルの感度に依存します。