プロセスの内訳は次のとおりです。
1。遺伝子の分離:
*所望の遺伝子は、制限酵素を使用してドナー生物のDNAから同定され、分離されます。これらの酵素は特定の配列でDNAを切断し、目的の遺伝子を放出します。
2。ベクトル構造:
*ベクター(多くの場合、プラスミドまたはウイルス)が選択され、遺伝子をレシピエント生物に運びます。
*分離された遺伝子は、リガーゼ酵素を使用してベクターに挿入され、DNA鎖を密閉します。
3。変換:
*遺伝子を含むベクターは、レシピエント生物(宿主細胞)に導入されます。これは、以下を含むさまざまな方法で実行できます。
* エレクトロポレーション: 電気パルスを適用して細胞膜に一時的な毛穴を作成し、ベクトルが入ることができます。
* トランスフェクション: 化学物質またはウイルスを使用して、ベクターを細胞に送り込みます。
* マイクロインジェクション: ベクトルを細胞に直接物理的に注入します。
4。選択とスクリーニング:
*遺伝子を正常に取り上げた細胞のみが選択されます。これは、抗生物質耐性マーカーまたはその他の選択メカニズムを使用して実現できます。
*次に、形質転換された細胞をスクリーニングして、遺伝子が宿主ゲノムに適切に組み込まれており、機能的であることを確認します。
5。遺伝子発現:
*遺伝子が宿主細胞のゲノムに統合されると、発現することができ、目的のタンパク質の産生につながります。
遺伝子クローニングの応用:
* 治療タンパク質の産生: インスリン、成長ホルモン、およびその他の重要なタンパク質のクローニング遺伝子。
* 遺伝子治療: 遺伝的障害のある患者の機能的な遺伝子と欠陥のある遺伝子を置き換える。
* 農業バイオテクノロジー: 害虫耐性、除草剤耐性、および作物の栄養含有量の改善のための遺伝子の導入。
* 研究開発: 遺伝子機能と調節の研究。
Gene Cloningは、医学、農業、および研究に広範なアプリケーションを備えた強力なツールです。