材料:
* 真菌培養: 望ましい真菌の純粋な培養、できれば寒天や板またはプレートで。
* スープメディア: 真菌の成長に適した滅菌液培地(例:サブローデキストローズスープ、ジャガイモデキストローススープ)。
* 滅菌Erlenmeyerフラスコまたは培養チューブ: 使用しているスープのボリュームに適したサイズ。
* Bunsenバーナーまたは滅菌フード: 無菌環境を維持するため。
* 滅菌接種ループまたは針: 真菌の培養を転送するため。
* 消毒剤: 洗浄表面に70%エタノールまたはその他の適切な消毒剤。
* 手袋: プロセス全体できれいな手袋を着用してください。
手順:
1。スープを準備:
*メーカーの指示に従ってスープメディアを準備します。
* 121°Cで15〜20分間オートクレーブすることにより、スープを滅菌します。
*接種する前に、スープを室温まで冷却します。
2。作業領域を滅菌する:
*消毒剤で作業エリアを完全に清掃します。
* Bunsenバーナーを使用している場合は、火をつけて炎の周りに滅菌ゾーンを作成します。滅菌フードを使用している場合は、電源を入れて、少なくとも15分間実行してください。
3。接種ツールを準備:
* Bunsen Burner Flame(熱から赤熱)または滅菌フード(フードの指示に従ってください)を使用して、接種ループまたは針を滅菌します。
*真菌の培養を転送する前に、ツールをわずかに冷まします。
4。真菌培養を転送:
*滅菌ゾーンの下に真菌培養容器(寒天スラントまたはプレート)を開きます。
* Bunsenバーナーを使用している場合、コンテナの開口部を簡単に炎上させます。
*滅菌接種ツールを使用して、コロニーの端から少量の真菌成長を慎重に除去します。
*接種は、フラスコまたはチューブの滅菌スープ培地に移します。
*接種がスープに沈んでいることを確認してください。
5。インキュベート:
*汚染を防ぐために、フラスコまたはチューブをしっかりと閉じます。
*真菌種の最適な温度で培養をインキュベートします。
*真菌の成長を定期的に監視します。
安全上の注意事項:
* 滅菌技術: 汚染を防ぐために、プロセス全体で不妊を維持します。
* ラボの安全性: 真菌の培養を処理するときに、白衣、手袋、目の保護を着用してください。
* 真菌の胞子: いくつかの真菌が呼吸器の問題を引き起こす可能性があるため、真菌の胞子が空中になる可能性に留意してください。換気の良いエリアで働きます。
重要なメモ:
* 真菌種: 特定の手順は、作業している真菌の種類によってわずかに異なる場合があります。適切な文献を参照するか、ガイダンスについては菌学者に相談してください。
* 成長条件: 特定の真菌種の要件に基づいて、インキュベーション条件(温度、pHなど)を最適化します。
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