レポーター酵素：変換を監視するための強力なツール
レポーター酵素は、宿主細胞における遺伝的変換の成功を監視するための貴重なツールであり、従来の選択可能なマーカーに対する補完的なアプローチを提供します。これらがどのように機能するかは次のとおりです。
1。レポーター遺伝子統合：
*特定の酵素（例：β-ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、または緑色蛍光タンパク質など）をコードするレポーター遺伝子は、関心のある外来DNAに関連しています。
*この遺伝子は、外来DNAとともに宿主細胞で発現するように設計されています。
2。レポーター酵素活性：
*レポーター酵素は、宿主細胞で発現する場合、容易に検出可能な信号を生成する特定の反応を触媒します。これは：
* 色の変化： X-gal基質に作用するときにβ-ガラクトシダーゼによって生成される青色のような。
* 発光： その基質の存在下でのルシフェラーゼによる光の生成で見られるように。
* 蛍光： UV光で照らされたときに緑色蛍光タンパク質（GFP）によって示される緑色の蛍光のように。
3。変換の視覚化：
*レポーター遺伝子を発現する細胞は特徴的な信号を示し、形質転換細胞の容易な識別と定量化を可能にします。
*このシグナルは、顕微鏡（蛍光または色の変化）の下で、またはルミノメーター（発光）を使用して観察できます。
選択可能なマーカーに対するレポーター酵素の利点：
* より速くて簡単なスクリーニング： レポーターの酵素アッセイは、抗生物質耐性を含む従来の選択方法よりも速く、より速く、より速く、より簡単です。
* 定量分析： レポーター酵素は、遺伝子発現レベルの定量的測定を可能にし、形質転換の効率に関する洞察を提供します。
* 非破壊： 変換されていない細胞を殺す選択方法とは異なり、レポーター酵素アッセイは非破壊的であり、形質転換細胞のさらなる分析を可能にします。
レポーター酵素とその応用の例：
* β-ガラクトシダーゼ： 大腸菌のクローニングのために青/白スクリーニングシステムと組み合わせてよく使用されるLACZ遺伝子を含む形質転換細胞を識別するために一般的に使用されます。
* ルシフェラーゼ： さまざまな生物の遺伝子発現を測定し、プロモーター活性を監視するために使用されます。
* 緑色蛍光タンパク質（GFP）： 生細胞における遺伝子発現とタンパク質の局在化を視覚化するための汎用性のあるレポーター。
結論：
レポーター酵素は、宿主細胞における形質転換効率と遺伝子発現を監視するための強力なツールを提供します。それらは、従来の選択可能なマーカーに迅速で敏感で非破壊的な代替品を提供し、遺伝的操作のより深い理解に貢献しています。
