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タンパク質沈殿の目的は何ですか?

タンパク質降水は、タンパク質を分離して精製するために使用される手法です 細胞溶解物や生物学的サンプルのような複雑な混合物から。 主要な目的の内訳は次のとおりです。

1。不要なタンパク質の除去:

*目的のタンパク質を選択的に沈殿させることにより、他のタンパク質と汚染物質を溶液から除去できます。

*これにより、目的のタンパク質のより集中的な分析が可能になり、他の分子からの干渉が減少します。

2。タンパク質の濃度:

*沈殿は、タンパク質を溶液から引き出すことにより、タンパク質を濃縮し、残りの溶液の濃度を増加させることができます。

*これは、低濃度で存在するタンパク質を研究するのに役立ちます。

3。ダウンストリーム分析の準備:

*降水は、次のようなさらなる分析のためにタンパク質を準備できます。

* ゲル電気泳動: サイズと電荷に基づいてタンパク質を分離します。

* 質量分析: タンパク質を識別して定量化する。

* 結晶化: 構造研究用。

4。干渉物質の除去:

*沈殿は、塩や洗剤などのタンパク質分析を妨げる物質を除去することができます。

それがどのように機能するか:

タンパク質沈殿は、タンパク質の溶解度の変化に依存しています。これは通常、次のように達成されます。

* pHの変更: タンパク質の等電点(PI)からpHをシフトすると、その溶解度が低下し、沈殿することがあります。

* 塩の追加(塩漬け): 高塩濃度は、タンパク質の周りの水和シェルを破壊し、それらを沈殿させる可能性があります。

* 有機溶媒の追加: エタノールやアセトンのような溶媒は、タンパク質を脱水し、溶解度を低下させる可能性があります。

* 特定の結合剤の使用: トリクロロ酢酸(TCA)や硫酸アンモニウムなどの一部の薬剤は、タンパク質と直接相互作用して沈殿させる可能性があります。

重要な注意: タンパク質降水は必ずしも完璧なテクニックではありません。それは時々につながる可能性があります:

* タンパク質活動の喪失: 一部のタンパク質は、プロセス中に変性し、その機能に影響を与えます。

* 不要なタンパク質の共沈着: 一部のタンパク質は、目的のタンパク質とともに沈殿し、最終産物の純度を減らすことができます。

これらの制限にもかかわらず、タンパク質の降水量は多くの生化学的および生物学的研究において貴重なツールのままです。

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