微小管解重合実験:
研究者は、ノコダゾールやコルヒチンなどの薬物を使用して、細胞内の微小管を解重合しています。微小管が分解されると、これらのトラックに沿ったオルガネラ、小胞、タンパク質の輸送が大幅に破壊されます。この観察結果は、細胞内の貨物の方向性の動きには、微小管が実際に必要であることを示唆しています。
ライブセルイメージングと追跡:
ライブセルイメージングや単一粒子追跡などの高度な顕微鏡法により、科学者は個々のオルガネラと分子の動きをリアルタイムで視覚化および追跡することができました。これらの実験により、微小管に沿って移動する運動タンパク質が、細胞内の特定のルートに沿って貨物を輸送する原因であることが明らかになりました。
運動タンパク質阻害:
ダイニンやキネシンなどの運動タンパク質の阻害を含む実験は、細胞内輸送における微小管の役割のさらなる証拠を提供しています。これらの運動タンパク質の機能をブロックすることにより、研究者は細胞内の特定の場所で貨物の蓄積を観察し、微小管と運動タンパク質が一緒に働いて効率的な輸送を促進することを示しています。
微小管の再生と輸送の回復:
微小管が溶解してから再生を許可すると、オルガネラと小胞の輸送が再開されます。この観察結果は、無傷の微小管の存在が正常な細胞内輸送プロセスの回復に不可欠であることを示しています。
単一分子イメージング:
総内部反射蛍光(TIRF)顕微鏡などの単一分子イメージング技術により、研究者は個々の運動タンパク質の動きと微小管との相互作用を非常に詳細に研究することができました。これらの実験は、微小管に沿った運動タンパク質媒介輸送に関与するステップの直接的な視覚化を提供しています。
要約すると、微小管の解重合、ライブセルイメージング、運動タンパク質阻害、微小管再調整、および単一分子イメージング技術を使用した実験は、微小管がこれらのマイクロチューブールの動きに沿った運動性タンパク質としての運動タンパク質としての運動タンパク質としての動きの動きを整える細胞内輸送のガイドトラックとして作用するという仮説を提供する実質的な証拠を提供しました。