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バナナから DNA を抽出する方法

バナナ、イチゴ、または他の倍数体植物から DNA を抽出するのは簡単です。ヒト細胞は二倍体です。つまり、各細胞核には、各染色体のコピーが 2 つ含まれています (各親から 1 つ)。倍数体細胞には複数の染色体のコピーが含まれているため、より多くの DNA を収集できます。

これは、一般的で安全な材料を使用して自宅で行うことができる簡単な DNA 抽出方法です。

材料

DNA抽出は複雑ではありません。いくつかの基本的な材料だけが必要です。

  • バナナ (またはイチゴまたは人間の頬細胞)
  • 蒸留水
  • 食器用洗剤
  • 消毒用アルコール
  • ビニール袋またはブレンダーまたはスムージーメーカー
  • コーヒーフィルターまたはペーパータオル
  • つまようじ、木の串、ガラス棒
  • 蒸留水は pH が中性で不純物がないため、水道水よりも優れています。ただし、蒸留水がない場合は、通常、水道水で問題ありません。
  • 半透明の食器用洗剤を使用するのが理想的です (曇ったり真珠光沢のあるものではありません)。ラウリル硫酸ナトリウム配合のシャンプーも効果的です。コンディショニング シャンプーではないことを確認してください。
  • 通常の食卓塩 (NaCl) を使用してください。
  • このプロジェクトでは、イソプロピル アルコールまたはエタノールのいずれかが機能します。アルコール度数の高い消毒用アルコール(イソプロピルアルコール)を選んでください。最良の結果を得るには、91%、95%、または 99% を選択します (60% から 75% ではありません)。または、変性アルコール (エタノール) を使用します。使用前にアルコールを冷凍庫に保管して冷やしてください。

バナナから DNA を抽出する方法

プロジェクトはビニール袋で行うか、試験管や小さなグラスを使用できます。このプロジェクトには危険はありません (ただし、飲まないでください)。キッチン ガラス製品を安全に使用し、食品と一緒に使用する前に洗浄することができます。ビニール袋よりもブレンダーやスムージー メーカーを使ったほうが抽出しやすくなりますが、バナナには十分な DNA が含まれているため、ビニール袋を使った方法でもうまくいきます。

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  • バナナ 1 本と水 1/2 カップをブレンドするか、材料をビニール袋に入れてよくつぶします。
  • 小さなカップに、小さじ 1 杯の食器用洗剤、小さじ 1/4 の塩、大さじ 2 の水を混ぜます。穏やかにかき混ぜて塩を溶かします。ただし、石鹸を振り回して泡を立てないようにしてください。
  • 大さじ 2 杯のバナナ混合物を洗剤混合物に加えます。ビニール袋を使用している場合は、マッシュしたバナナが入っている袋に混合洗剤を入れます。
  • 材料をよく混ぜます。
  • コーヒー フィルターまたはペーパー タオルで液体をろ過します。良い方法は、輪ゴムを使用してフィルターをガラスの上に固定することです。または、フィルターを漏斗の中に入れ、漏斗をガラスの上に置きます。混合物が濃いため、液体がフィルターを通過するのに時間がかかります。ろ紙を絞る衝動を抑えて、プロセスをスピードアップしてください。
  • 約10分後、液(ろ液)を採取します。バナナとろ紙は捨てて構いません。
  • 約 15 ミリリットルの冷たいアルコールを液体に滴下します。かき混ぜないでください。理想的には、バナナ液の上にアルコールの層が見えるはずです.アルコールと濾液をそのまま 4 ~ 5 分間放置します。 DNA は、アルコールとバナナの層の間の界面で、濁ったまたは白い綿状の物質として沈殿します。
  • つまようじ、木製の串、または細いガラス棒を液体に浸し、ゆっくりと回転させて DNA を巻き取ります。可能であれば、虫眼鏡を使用して DNA を調べます。顕微鏡をお持ちの場合は、DNA の塊をスライドに置きます。つまようじを使って DNA 鎖をそっと切り離し、よく見えるようにします。
  • バナナから DNA を抽出する仕組み

    • バナナをつぶすと、植物細胞の表面積が増え、DNA の抽出が容易になります。水を加えると、細胞が互いに分離しやすくなります。バナナをよくブレンドするほど、抽出が効率的になります。
    • 食器用洗剤に含まれる洗剤やその他の界面活性剤は、細胞壁 (植物の場合)、細胞膜、核膜の脂質二重層を分解します。
    • 研究室では、プロテアーゼと呼ばれる酵素がタンパク質を分解して、DNA から分離できるようにします。
    • 研究室では、RNA を分解するためにリボヌクレアーゼと呼ばれる酵素も追加するかもしれません。
    • 塩または塩化ナトリウムは、DNA に結合したタンパク質を除去し、DNA が凝集するのを助けます。
    • DNA は、氷冷アルコール中で溶液から沈殿します。アルコールが熱すぎると、DNA の一部が溶解したままになります。
    • 研究室では、次のステップは遠心分離です。遠心分離機は固体の DNA をペレットとして収集するため、混合物からより多くの DNA が回収されます。

    DNA 抽出履歴

    DNA 抽出は、分子としての DNA の発見よりも前に行われました。 1869年、スイスの生物学者で医師のフリードリッヒ・ミーシャーが白血球の核からDNAを抽出しました。彼は収集した資料が遺伝に関与していると理論づけました。ミーシャーの時代以来、科学者たちは抽出方法を改良してきました。アルコールの代わりに、フェノールとクロロホルムが DNA からタンパク質を分離します。制限酵素とポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) は、研究者が DNA を増幅するのに役立ちます。つまり、小さなサンプルから DNA の多くのコピーを作成することが可能です。

    参考文献

    • Dahm, R. (2008 年 1 月)。 「DNAの発見:フリードリッヒ・ミーシャーと核酸研究の初期」。 人類の遺伝学 . 122(6):565–81. doi:10.1007/s00439-007-0433-0
    • リー、リチャード (2015)。 法医学 (第 2 版)。ボカラトン:CRCプレス。 ISBN 9781439889701.
    • Marmur, J. (1961). 「微生物からデオキシリボ核酸を分離するための手順」。 Journal of Molecular Biology . 3 (2):208–IN1。 doi:10.1016/S0022-2836(61)80047-8
    • Pääbo, S. (1989 年 3 月)。 「古代DNA:抽出、特徴付け、分子クローニング、および酵素増幅」. アメリカ合衆国国立科学アカデミーの議事録 . 86 (6):1939–43. doi:10.1073/pnas.86.6.1939
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