グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ（G6PD）アッセイの原理は、G6PDによって触媒される酵素反応に基づいています。 G6PDは、還元剤であるNADPHを生成する代謝経路であるペントースリン酸経路で重要な役割を果たす酵素です。
このアッセイでは、G6PDは、NADP+を電子受容体として使用して、グルコース-6-リン酸（G6P）への酸化を6-ホスホグルコネート（6-pg）に触媒します。この反応中、NADP+はNADPHに還元され、340 nmで強い吸光度を示します。時間の経過とともに340 nmでの吸光度の増加を測定することにより、G6PDの酵素活性を定量化できます。
G6PDアッセイに関連する重要な手順は次のとおりです。
1。サンプル準備： 細胞溶解物や組織ホモジネートなどのG6PDを含むサンプルが準備されています。
2。反応混合物： 反応混合物には、通常、G6P、NADP+、バッファ溶液、およびG6PDを含むサンプルが含まれます。
3。インキュベーション： 反応混合物を特定の温度とpHでインキュベートし、酵素反応が発生するようにします。
4。分光光度測定： 反応混合物の吸光度は、分光光度計を使用して340 nmで測定されます。この吸光度の読み取り値は、生成されたNADPHの量に対応しています。
5。計算： 時間の経過に伴う340 nmでの吸光度の変化は、G6PDの酵素活性を計算するために使用されます。この計算では、NADPHの絶滅係数と反応混合物の体積を考慮します。
6。酵素活性の単位： G6PD活性は一般に、1リットルあたりの単位（U/L）またはリットルあたりの国際単位（IU/L）で発現します。酵素活性の1つは、指定されたアッセイ条件下で1分あたり1マイクロモルのNADPHを生成するために必要な酵素の量を表します。
G6PD活性の測定には臨床的意義があります。G6PDの欠陥はG6PD欠乏症として知られる状態につながる可能性があり、特定の薬物または物質にさらされると溶血性貧血を引き起こす可能性があります。 G6PDアッセイは、G6PD欠乏症を診断し、状態の個人の酵素活性を監視するために実行されます。
