1。サンプル準備:
* DNAは細胞から抽出され、制限酵素で消化されます。これらの酵素は特定の配列でDNAを切断し、さまざまなサイズの断片を作成します。
* DNAフラグメントは、視界のために染料(通常はブロモフェノールブルー)を含む荷重バッファーと混合され、濃い溶液(グリセロールなど)がゲルに沈むのを助けます。
2。ゲル準備:
*ゲルは、アガロースやポリアクリルアミドなどの多孔質材料を使用して作られています。ゲルはふるいとして機能し、小さなDNAフラグメントが大きな断片よりも簡単に移動できるようにします。
*ゲルは、電気を伝導する緩衝液で満たされた電気泳動チャンバーに入れられます。
3。電気泳動:
* DNAサンプルは、ゲルの一方の端にあるウェルにロードされます。
*電流がゲル全体に適用されます。
* DNAは負に帯電しているため、正の電極に向かって移動します。
*小さなDNAフラグメントは、大きなフラグメントよりも速くゲルを通過し、サイズに基づいて分離します。
4。視覚化:
*電気泳動後、DNAフラグメントは、DNAに結合し、UV光の下で視覚化できる蛍光色素(臭化エチジウムやSYBRグリーンなど)で染色されます。
* DNAフラグメントはゲル上のバンドとして表示され、ゲルのさらに小さなフラグメントがさらに表示されます。
異なる長さのDNAセグメントを分離する他の方法:
* クロマトグラフィ: この方法では、DNAフラグメントの異なる特性を使用して、静止相に対する親和性など、それらを分離します。
* 毛細管電気泳動: ゲル電気泳動に似ていますが、ゲルの代わりに狭い毛細血管チューブを使用します。この方法は、より高い解像度とより速い分離を提供します。
* フィールドフロー分別(FFF): この手法は、サイズと拡散特性に基づいて分子を分離します。キャリア液の層流を使用し、畑(重力または電界など)を使用して粒子を分離します。
DNA分離の応用:
* 遺伝分析: 突然変異、遺伝的障害、父性検査の特定。
* フォレンジック: 犯罪現場から容疑者へのDNAサンプルの一致。
* 研究: 遺伝子発現、遺伝子調節、およびタンパク質相互作用の研究。
* バイオテクノロジー: 新薬と診断ツールの開発。
DNAセグメントを分離する方法の選択は、特定のアプリケーションと研究対象のフラグメントのサイズ範囲に依存します。