1。挿入統合の確認：
* 制限酵素消化と分析： 遺伝子修飾が特定の遺伝子を挿入することを伴う場合、修飾生物のDNAは、挿入された遺伝子内の特定の部位を切断する制限酵素で消化することができます。得られたフラグメントは、ゲル電気泳動によって分離できます。予想されるフラグメントサイズの存在は、遺伝子の統合を確認します。
* PCR増幅と分析： 特定のプライマーは、挿入された遺伝子配列を増幅するように設計できます。増幅された産物の存在は、遺伝子の統合が成功したことを示しています。
2。表現の検証：
* RNA分離と分析： 修飾生物から抽出されたRNAは、ゲル電気泳動で分析して、挿入された遺伝子に対応するmRNAの存在を検出できます。これは、遺伝子が転写されていることを確認します。
* ウエスタンブロット分析： この手法は、挿入された遺伝子のタンパク質産物の存在を検出できます。
例：
除草剤耐性の遺伝子を発現するために植物を遺伝的に修飾したと想像してください。
* ステップ1： 修正された植物と未修飾植物の両方からDNAを隔離します。
* ステップ2： 制限酵素を使用してDNAを切断し、特に除草剤耐性遺伝子が挿入された領域を標的とします。
* ステップ3： ゲル電気泳動装置で消化DNAを実行します。
* ステップ4： 挿入された遺伝子のサイズに対応するゲル内の特定のバンドを探します。 バンドが修正された植物に存在するが、変更されていない植物に存在しない場合、遺伝子の統合が成功することを確認します。
制限：
*ゲル電気泳動は、常に最も敏感な手法ではありません。遺伝子発現や少量の挿入DNAの小さな変化を検出しない場合があります。
*ゲル電気泳動のみを使用して、異なるタイプの変異または遺伝子挿入を区別することは困難です。
*ゲル電気泳動は目的の遺伝子の存在を確認できますが、その機能を確認することはできません。遺伝子が実際に発現していることを確認し、正しく動作していることを確認するために、さらなる機能的研究が必要です。
その他の手法：
ゲル電気泳動は、シーケンス、サザンブロッティング、QPCRなどの他の手法と組み合わせて使用され、遺伝子修飾実験のより包括的な評価を提供することがよくあります。
結論として、ゲル電気泳動はDNAとRNAを分析するための強力なツールであり、遺伝子修飾実験の成功を評価するために使用できます。ただし、他の方法と手法を使用して結果を確認し、実験の成功を完全に評価することが重要です。
