事前に染色されたタンパク質:ゲル電気泳動のためのすぐに使用できるタンパク質マーカー
事前に染色されたタンパク質は、染料に共有結合されたタンパク質混合物です 。これにより、ゲルで直接視覚化することができます 、個別の染色手順の必要性を排除します。 それらは一般に分子量マーカーとして使用されます ゲル電気泳動、特に sds-page (ドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動)。
重要な側面の内訳は次のとおりです。
1。なぜ事前に染色されたタンパク質を使用するのですか?
* 利便性: 個別の染色は必要ありません。時間と労力を節約します。
* 視覚追跡: 電気泳動中のタンパク質分離の進行を追跡できます。
* 正確なサイズの決定: 未知のタンパク質の分子量を決定するための基準点を提供します。
* トラブルシューティング: 誤ったゲルの荷重や不均一なランニングなど、電気泳動セットアップの潜在的な問題を特定するのに役立ちます。
2。事前に染色されたタンパク質の仕組み:
* 染料の結合: タンパク質は、通常は蛍光または色の染料である染料に共有結合しています。
* 電気泳動移動度: 色素はタンパク質の電気泳動移動度を有意に変化させません。つまり、分子量に応じて移動します。
* 視覚化: 染料は、紫外線下または可視光のいずれかで、ゲル上のタンパク質バンドの直接視覚化を可能にします。
3。事前に染色されたタンパク質の主要な特徴:
* 分子量範囲: さまざまな実験的ニーズに合わせて、さまざまな範囲で利用できます。
* 染料の特性: 使用された染料は、バンドの感度と視界に影響します。
* 安定性: いくつかの事前に染色されたタンパク質は他のタンパク質よりも安定しており、過酷な状態に耐えることができます。
* 互換性: 電気泳動バッファーとゲルタイプとの互換性を確保します。
4。事前に染色されたタンパク質の応用:
* SDS-PAGE分子量マーカー: 最も一般的なアプリケーション。
* ウエスタンブロッティング: 転送されたタンパク質のサイズ参照として使用されます。
* タンパク質精製モニタリング: 精製手順中にタンパク質の移動を追跡する。
* ゲル電気泳動トラブルシューティング: 不均一なジェルの負荷などの問題の診断に役立ちます。
5。事前に染色されたタンパク質マーカーの種類:
* レインボーマーカー: 各バンドを簡単に識別するために、異なる色のタンパク質を混合しています。
* 単色マーカー: 単一の染料を封じ込め、視覚的な差別化を減らしますが、特定のアプリケーションに役立ちます。
6。事前に染色されたタンパク質を使用する利点:
* 単純化されたワークフロー: 個別の染色ステップを排除し、時間と労力を節約します。
* 視覚追跡: 電気泳動中のタンパク質分離のリアルタイム監視が可能になります。
* 信頼できるサイズの決定: 正確な分子量参照を提供します。
* トラブルシューティング補助: 電気泳動セットアップの潜在的な問題を特定するのに役立ちます。
7。事前に染色されたタンパク質を使用することの欠点:
* コスト: 従来のタンパク質標準よりも高価になる可能性があります。
* 感度: 特に低積立タンパク質の場合、従来のタンパク質標準ほど敏感ではない可能性があります。
* 染料干渉: 色素は、タンパク質配列決定や質量分析などの特定の下流の用途を妨害する可能性があります。
全体として、事前に染色されたタンパク質は、ゲル電気泳動を操作する研究者にとって便利で貴重なツールです。それらは、タンパク質の移動を追跡し、分子量を決定するためのシンプルで信頼できる方法を提供します。ただし、特定のアプリケーションに適したマーカーを選択し、潜在的な制限を考慮することが重要です。