細胞接合を観察するための手法
* 光学顕微鏡:
* 明るいフィールド顕微鏡: 最も詳細ではありませんが、明るいフィールド顕微鏡は、細胞の形状と細胞の接続方法の基本的なビューを提供できます。
* 位相対照顕微鏡: この手法は、セル内のコントラストを強化し、細胞接合の輪郭を簡単に確認できます。
* 微分干渉コントラスト(DIC)顕微鏡: DICは、3次元のホログラフィック様画像を生成し、細胞接合の視覚化を改善します。
* 電子顕微鏡(EM): 超微細構造の詳細:
* 透過電子顕微鏡(TEM): TEMは非常に高解像度の画像を提供します。細胞の薄い部分は重金属で染色され、電子が通過する電子は細胞接合の詳細なアーキテクチャを明らかにします。
* 走査型電子顕微鏡(SEM): SEMは細胞の表面の3D画像を作成し、細胞接合の形態をより詳細に示します。
細胞接合部を研究するための特定の準備:
* 細胞培養: 科学者はしばしば培養細胞(研究室で栽培)を使用して細胞接合部を研究します。培養細胞は、組織の細胞よりも操作して観察するのが簡単です。
* 組織の準備:
* 固定: 細胞と組織は化学的に処理され(固定)、構造を保存し、分解を防ぎます。
* 埋め込み: 固定組織は、セクション中にサポートするために、ワックスや樹脂などの固体培地に埋め込まれています。
* セクション: 埋め込まれた組織の薄いスライスは、ミクロトームを使用して切断され、光または電子顕微鏡で十分に薄い切片を作成します。
* 染色: 特定の染料と染色は、さまざまな細胞構造と成分を強調するために使用され、細胞接合部をより見やすくします。
観察する細胞接合のタイプ:
* タイトジャンクション: これらの接合部は、細胞間に密閉されたシールを形成し、それらの間の流体と分子の通過を防ぎます。
* 接着ジャンクション: これらの接合部は、細胞間の強い接着を提供し、「接着剤」のように機能します。それらは、細胞を結合するカドヘリンのようなタンパク質を含みます。
* デスモソーム: 接着接合部と同様に、デスモソームは強い接着を提供しますが、それらは隣接する細胞の中間フィラメントを接続するスポット状の構造です。
* ギャップジャンクション: これらの接合部は、細胞間の直接通信、イオンと小分子の通過を可能にするチャネルとして機能します。
重要な考慮事項:
* 特異性: 科学者は、細胞接合部に見られるタンパク質に特異的に結合する抗体を使用する場合があります。これにより、特定のタイプの接合部の標的染色と視覚化が可能になります。
* 標本の準備: 細胞または組織の適切な調製は、細胞接合部の完全性を確保し、高品質の画像を取得するために重要です。
実験の例:
科学者は、腸の裏地の緊密な接合部が特定の薬の影響を受けることを研究したいと考えています。彼らは:
1。培養中の腸上皮細胞を成長させます。
2。薬物でいくつかの細胞を治療し、他の細胞を対照溶液で治療します。
3。電子顕微鏡のために細胞を修正して準備します。
4。画像を分析して、処理された細胞と未処理の細胞の密着結合の構造を比較します。
適切な手法と分析を組み合わせることにより、科学者は、組織の組織とコミュニケーションに不可欠な細胞接合の構造と機能について貴重な洞察を得ることができます。