1。外国DNAの運搬と複製:
* 複製起点(ORI): ベクターは複製(ORI)配列の起源を持ち、宿主細胞内で独立して複製できるようにし、挿入されたDNAフラグメントの増殖を保証します。
* 複数のクローニングサイト(MCS): MCSは、一連の制限酵素認識部位を含む領域であり、特定の制限酵素を使用して外来DNAを挿入できます。
2。選択と識別:
* 選択可能なマーカー: ベクターは、抗生物質耐性遺伝子のような選択可能なマーカー遺伝子を組み込みます。これにより、抗生物質の存在下で生存するため、ベクターを正常に取り上げた細胞の選択が可能になります。
* レポーター遺伝子: LACZのようなレポーター遺伝子は、ベクターを含む細胞の簡単な識別を可能にします。それらは、視覚信号を提供する検出可能なタンパク質を表現します。
3。挿入されたDNAの発現:
* 転写と翻訳信号: 多くの場合、ベクターはプロモーターやその他の調節要素を持ち、宿主細胞内に挿入された遺伝子の転写と翻訳を保証し、タンパク質の発現を可能にします。
4。特定のベクトルタイプ:
* プラスミド: クローニングで一般的に使用される小さな円形DNA分子。それらは細菌内で容易に複製されます。
* 細菌: バクテリアに感染するウイルスは、外来DNAを運ぶために変更できます。
* cosmids: プラスミドとバクテリオファージの特徴を組み合わせたハイブリッドベクターは、高いクローニング能力を提供します。
* 酵母人工染色体(YACS): 一般的に真核生物に見られる大きなDNA断片をクローンするために使用される人工染色体。
要約:
クローニングベクターは、遺伝子のクローニングと操作に不可欠であり、以下の重要なツールを提供します。
* 外国DNAの持ち運びと複製。
* ベクトルを含むセルの選択と識別。
* 挿入されたDNAの発現を有効にします。
* 目的のアプリケーションに適切なベクトルタイプを選択します。
これらは、遺伝子治療、タンパク質生産、遺伝子工学など、研究、バイオテクノロジー、およびさまざまな用途に重要です。