これらがどのように機能するかの内訳は次のとおりです。
* 特異性: 各制限酵素は、制限部位と呼ばれる特定の短いDNA配列(通常4〜8塩基対の長さ4〜8ペア)を認識します。このシーケンスは通常、パリンドロミックであり、同じ前方と後方を読み取ることを意味します。
* 切断: 制限酵素が特定の部位を見つけると、その時点でDNA分子を削減します。
* 粘着端: いくつかの制限酵素は、「粘着性の端」として知られる短い一本鎖のオーバーハングを残し、途切れのある切断を行います。これらの粘着性の端は、同じ酵素でカットされた他のDNAフラグメントからの相補的な粘着性の端をベースペアで、異なるDNA分子の結合を促進します。
遺伝子クローニングのコンテキストで:
1。遺伝子とプラスミドの切断: 目的の遺伝子とプラスミドは両方とも同じ制限酵素で切断されます。
2。ライゲーション: 遺伝子とプラスミドの切断端は、DNA鎖間にホスホジエステル結合を形成する酵素であるDNAリガーゼを使用して結合されます。
3。変換: 得られたハイブリッド分子(プラスミドに挿入された遺伝子を含む)が細菌に導入され、そこで挿入された遺伝子を複製して発現させることができます。
したがって、ハイブリッド分子の構築における制限酵素の役割は、次のように重要です。
* 特定の部位でDNAを正確に切断します。
* 異なるDNAフラグメントを結合するための互換性のある端を生成します。
このプロセスは、遺伝子クローニング、遺伝子工学、および分子生物学の他の領域において基本的です。