1。細胞溶解：
* 破壊： このステップでは、細胞を開いてDNAを放出することが含まれます。これは、細胞タイプに応じて、さまざまな方法で実現できます。
* 物理的混乱： 植物や動物の細胞には、研削、ブレンド、超音波処理などの機械的方法が使用できます。
* 化学溶解： リゾチームのような洗剤と酵素は、細胞膜と壁を分解する可能性があります。
* 細胞破片の除去： 放出されたDNAは、他の細胞成分と混合されます。遠心分離は、DNAを破片から分離するために使用され、DNAを含む上清を残します。
2。 DNA沈殿：
* 塩の追加： 高塩濃度は、DNAバックボーンの負電荷を中和するのに役立ち、溶液から沈殿することができます。
* アルコールの追加： エタノールまたはイソプロパノールが溶液に添加され、DNAの溶解度が低下し、溶液から沈殿します。
3。 DNA分離：
* 遠心分離： 沈殿したDNAは、遠心分離によって収集されます。 DNAは、チューブの底にペレットを形成します。
* 洗濯： ペレットは、塩やタンパク質などの不純物を除去するために緩衝液で洗浄されます。
4。 DNA精製：
* 酵素消化： RNaseなどの酵素を使用して、RNA汚染を除去できます。
* 列クロマトグラフィー： この手法は、サイズ、電荷、または結合親和性に基づいて、DNAを他の分子から分離します。
5。 DNAの定量化：
* 分光測光法： DNAの濃度は、特定の波長（260 nm）での吸光度によって測定されます。
* 蛍光測定： 蛍光色素はDNAに結合して光を放出し、定量化を可能にします。
6。 DNAストレージ：
* 凍結： 孤立したDNAは、長期貯蔵のために-20°Cまたは-80°Cで保存できます。
DNA分離の一般的な手法：
* フェノールクロロホルム抽出： 有機溶媒を使用してDNAをタンパク質から分離する古典的な方法。
* 塩漬け： 塩を利用してDNAを沈殿させるよりシンプルな方法。
* スピン列： 膜を使用してDNAを結合し、不純物を除去する便利なキット。
* 磁気ビーズベースの分離： DNA結合剤でコーティングされた磁気ビーズを使用して、DNAを分離します。
これらの技術により、科学者はさまざまなソースから純粋なDNAを取得することができ、遺伝子クローン、DNAシーケンス、遺伝子検査など、幅広い分子生物学研究を実施できるようにします。
