トランスジェニックマウスの作成：ステップバイステップガイド
トランスジェニックマウスの作成には、マウスゲノムに外来DNAを導入し、新しい遺伝子を表現する子孫をもたらします。一般的な方法の内訳は次のとおりです。
1。 導入遺伝子の構築：
* 目的の遺伝子を識別して分離します： これは、別の生物の遺伝子、マウス遺伝子の修正バージョン、または完全に合成遺伝子である可能性があります。
* 導入遺伝子構築物を設計： これには、遺伝子発現を制御するために調節要素（プロモーターとエンハンサー）を組み込むこと、および簡単な追跡のためにレポーター遺伝子を潜在的に追加することが含まれます。
* 導入遺伝子を線形化： これにより、DNAは宿主ゲノムに統合するために準備します。
2。 配信方法：
* 外核注射： これは最も一般的な方法です。
* 受精卵は雌マウスから収穫されます。
* 導入遺伝子は、受精卵の前核（核融合の前）に注入されます。
* 注入された卵は、代理母親に埋め込まれます。
* 胚性幹細胞（ESC）注入：
* ESCは培養され、遺伝的に導入遺伝子を封じ込めるように修正されます。
* 修正されたESCは、胚盤胞（初期胚）に注入されます。
* これらのキメラ胚（元の細胞と修飾細胞の両方を含む）は、代理母に埋め込まれています。
* 生殖系統で導入遺伝子を運ぶ子孫が識別されます。
* ウイルスベクター：
* ウイルスは、導入遺伝子を運び、標的細胞に送達するように設計されています。
* ウイルスは胚または成体マウスに注入されます。
* 導入遺伝子は感染細胞のゲノムに統合されます。
3。 スクリーニングと特性評価：
* トランスジェニック動物を識別する： PCRとサザンブロッティングは、創業者（導入遺伝子がゲノムに統合されているマウス）と子孫を特定するために使用されます。
* 導入遺伝子発現を評価： RT-PCR、ウエスタンブロッティング、免疫組織化学などの技術を使用して、異なる組織における導入遺伝子の発現を評価します。
* 表現型分析： 動物の生理学、行動、および疾患の感受性に対する導入遺伝子の影響を調査します。
4。 トランスジェニックラインの繁殖と維持：
* トランスジェニックの創設者は、トランスジェニック動物のコロニーを確立するために飼育されます。
* 定期的な繁殖により、導入遺伝子のその後の世代への安定した伝播が保証されます。
* トランスジェニックラインの遺伝的背景は、望ましくないバリエーションを避けるために慎重に制御されています。
注：
*トランスジェニックマウスは研究のための強力なツールですが、慎重な倫理的考慮事項と適切な動物飼育が必要です。
*トランスジェニックマウスの生成に使用される特定の方法とプロトコルは、目的の結果と目的の特定の遺伝子によって異なる場合があります。
これは単純化された概要です。トランスジェニックマウスの作成は、さまざまな技術と専門知識を含む複雑なプロセスです。
