材料
* 寒天プレート: 固化栄養培地(寒天)を含む滅菌ペトリ皿。
* 細菌: あなたの選んだ細菌。これは、環境からのサンプル、ラボの緊張、または勉強している特定のタイプです。
* 滅菌接種ループ/針: 細菌を転送するためのツール。
* Bunsenバーナーまたはアルコールランプ: ループを滅菌し、滅菌作業領域を作成するために使用されます。
* インキュベーター(オプション): 最適な成長温度に使用されます。
* 手袋: 手袋を着用して不妊を維持し、汚染から身を守ります。
手順
1。ワークスペースを準備:
*消毒剤溶液(たとえば、イソプロピルアルコール70%)でワークスペースを消毒します。
* Bunsenバーナーまたはアルコールランプをオンにします。炎はその周りに滅菌ゾーンを作成します。
* 重要: 気流が汚染物質を導入できるため、常に炎の近くで動作します。
2。接種ループ/針を滅菌:
*炎の最もホットな部分にループ/ニードルを、赤熱するまで保持します。
*細菌を移す前に、少し冷ましてください。
3。細菌のサンプルを取得します:
* 文化から: 細菌を含む培養チューブまたはフラスコを慎重に開き、汚染を防ぐために開口部の上にふた/ストッパーを保持します。
* 環境から: 環境(土壌、水など)のサンプルを使用している場合は、可能であれば(炎のように)サンプル表面を滅菌します。
* スワブから: スワブを使用している場合は、汚染を避けるために滅菌し、慎重に処理してください。
4。プレートのストリーキング:
*寒天プレートを斜めに開き、蓋を開けて開きます。
*滅菌されたループ/針を使用して、細菌源に触れてから、寒天の表面に直線を作り、少量の細菌を残します。
*ループをもう一度滅菌します。
* 象限ストリーキング: 孤立したコロニーを得るには、象限の縞を実行します。プレートを90度回転させ、以前にストリークしたラインをソースとして使用して、最初の線とわずかに重複する2番目の線を縞模様にします。さらに2つの象限を繰り返します。
5。インキュベーション(オプション):
*寒天プレートをしっかりと閉じて、日付、細菌の名前、イニシャルでラベルを付けます。
*細菌の最適温度でプレートをインキュベートします(通常、ほとんどの細菌では37°C)。
重要な考慮事項:
* 不妊: 汚染を防ぐために、プロセス全体を通して無菌技術を維持します。
* 適切な取り扱い: こぼれや破損を防ぐために、プレートを慎重に処理します。
* 処分: ラボの安全プロトコルに従って、寒天プレートを含む使用済み材料を適切に処分します。
ヒント:
*相互汚染を避けるために、新しいストリークごとに滅菌接種ループを使用します。
*危険な細菌を使用する場合は、生物学的安全性キャビネットを使用してください。
*このプロセスのあらゆる側面について確信が持てない場合は、ラボインストラクターまたは資格のある微生物学者に相談してください。
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