これがどのように機能しますか:
1。 DNAポリメラーゼ は、DNAを複製する酵素であり、テンプレート鎖を相補的な新しい鎖を作成します。
2。放射性標識ヌクレオチド (DNTP)は、新しいDNA鎖の構成要素として提供されます。これらのDNTPには、構造に組み込まれた³²pや³Hなどの放射性同位体が含まれています。
3. DNAポリメラーゼがテンプレート鎖を複製すると、これらの標識ヌクレオチドが新しく合成された鎖に組み込まれ、放射性標識DNA をもたらします 。
次のようなさまざまな技術で使用されるさまざまな種類のDNAポリメラーゼがあります。
* klenowフラグメント: DNAポリメラーゼIの修正形態は、放射能プローブを使用したDNAフラグメントの標識に使用されます。
* taqポリメラーゼ: DNAを増幅するためにPCR(ポリメラーゼ連鎖反応)で使用される熱安定性酵素(ポリメラーゼ連鎖反応)が増幅されたヌクレオチドの増幅産物への取り込みを可能にします。
他の酵素がプロセスに関与している可能性があることに注意することが重要です。
* 制限酵素 標識のためにDNAを特定のフラグメントにカットします。
* リガーゼ 他の分子に標識DNAフラグメントを結合する。
特定の酵素と技術の選択は、希望する結果と放射性標識DNAの特定の応用に依存します。