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PCRに必要な化学物質と分子は、各成分の機能は何ですか?

PCRコンポーネントとその機能:

1。テンプレートDNA:

* 関数: 増幅するDNA配列。ポリメラーゼ酵素がコピーするための青写真として機能します。

2。プライマー:

* 関数: テンプレートDNA上の特定の領域に相補的な短い一本鎖DNA配列(通常18〜30ヌクレオチド)。それらはテンプレートDNAに結合し、DNAポリメラーゼの出発点を提供します。

3。 DNAポリメラーゼ:

* 関数: テンプレートDNAとプライマーを使用して新しいDNA鎖を合成する酵素。 プライマーの3 '端に5インチから3'の方向にヌクレオチドを加えます。

4。デオキシヌクレオシド三リン酸(DNTP):

* 関数: DNAのビルディングブロック。それらは、4つの塩基(アデニン、シトシン、グアニン、チミン)を表すDATP、DCTP、DGTP、およびDTTPの4つのタイプで構成されています。 DNAポリメラーゼはこれらを使用して新しいDNA鎖を組み立てます。

5。バッファソリューション:

* 関数: 最適なDNAポリメラーゼ活性のために適切なpHおよびイオン強度を維持する塩とイオンが含まれています。

6。塩化マグネシウム(MGCL2):

* 関数: 触媒活性に必要なDNAポリメラーゼの補因子。また、DNA構造の安定化にも役立ちます。

7。水:

* 関数: 反応の溶媒とコンポーネントが相互作用する媒体を提供します。

PCRプロセスの簡単な要約:

1。変性: 反応混合物を94〜98°Cに加熱し、二本鎖テンプレートDNAを単一鎖に分離します。

2。アニーリング: 温度は50〜65°Cに下げられ、プライマーが一本鎖テンプレートDNA上の相補的配列に結合することができます。

3。拡張子: 温度は、DNAポリメラーゼの最適温度である72°Cに上昇します。ポリメラーゼはプライマーを拡張し、DNTPを追加して新しいDNA鎖を作成します。

これらの3つのステップは複数のサイクルで繰り返され、ターゲットDNA配列が指数関数的に増幅されます。

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