免疫沈降とウエスタンブロットの主な違い 免疫沈降では、抗体とアガロース ビーズを使用して溶液から標的タンパク質を分離しますが、ウェスタン ブロットではゲル電気泳動と抗体プローブを使用してタンパク質を分析します。
免疫沈降とウエスタンブロットは、タンパク質分析の 2 つの手法です。免疫沈降は放射性標識を使用しますが、ウエスタンブロットは分離されたタンパク質の可視化に抗体を使用します。
主な用語
免疫沈降、タンパク質分析、ウエスタンブロット 
免疫沈降とは
免疫沈降は、標的タンパク質への抗体特異的結合を利用して溶液からタンパク質を沈殿させる技術です。何千ものタンパク質の中で、タンパク質を溶液から分離および濃縮することが重要です。さらに、その抗体は固体基板に結合されます。ただし、この技術は、個々のタンパク質の免疫沈降、タンパク質複合体の免疫沈降、クロマチンの免疫沈降、リボ核タンパク質の免疫沈降、およびタグタンパク質において重要です。
図 1:クロマチン免疫沈降
さらに、免疫沈降には直接、間接、選択の 3 つの方法があります。直接免疫沈降法では、標的タンパク質に特異的な抗体を使用して、標的タンパク質を固体表面に固定します。間接免疫沈降法では、タンパク質群に特異的な抗体を固定化に使用します。また、溶液中の目的タンパク質の濃度が低い場合の選択方法も重要です。
ウェスタン ブロットとは
ウエスタンブロットまたは免疫ブロットは、サイズと特異性によって溶液中のタンパク質を検出する技術です。この方法では、タンパク質を分離するために、サイズによる分離、固体支持体へのタンパク質の転写、視覚化するための一次および二次抗体を使用した標的タンパク質のマーキングという 3 つのタスクを使用します。
図 2:ウェスタン ブロット
まず、一次抗体が標的タンパク質に結合します。次に、二次抗体が一次抗体に結合します。次は二次抗体の結合です。最後に、染色、免疫蛍光、または放射能のいずれかによって検出が行われます。ただし、溶液中のタンパク質は、抗体の検出および特異的結合の前に、ゲル電気泳動によってサイズごとに分画されます。
免疫沈降とウエスタンブロットの類似点
- 免疫沈降とウエスタンブロットは、溶液からタンパク質を分離する 2 つの技術です。
- さらに、どちらも特定の抗体を使用して、その過程でタンパク質を標的とします。
免疫沈降とウエスタンブロットの違い
定義
免疫沈降は、特定のタンパク質に特異的に結合する抗体を使用して、溶液からタンパク質抗原を沈殿させる技術を指し、ウエスタンブロットは分子生物学で広く使用されている分析技術を指し、組織ホモジネートまたは抽出物のサンプル中の特定のタンパク質を検出するための免疫遺伝学。
重要性
通常、免疫沈降では抗体とアガロース ビーズを使用して溶液から標的タンパク質を分離しますが、ウェスタン ブロットではゲル電気泳動と抗体プローブを使用してタンパク質のサイズと量を分析します。
タンパク質の構造
免疫沈降はタンパク質の本来のコンフォメーションに作用し、ウエスタンブロットはタンパク質の変性段階を分析します。
集中力
さらに、免疫沈降には高濃度のタンパク質が必要ですが、ウェスタンブロッティングは溶液中の低濃度のタンパク質に適用できます.
識別
ただし、免疫沈降では放射性標識を使用しますが、ウエスタンブロットでは酵素と結合した抗体を使用します.
結論
簡単に言うと、免疫沈降とウエスタンブロットは、溶液からタンパク質を分離する 2 つの手法です。免疫沈降では、標的タンパク質が溶液から沈殿しますが、ウエスタンブロットでは、溶液のタンパク質がサイズによって分画されます。ただし、どちらも抗体を使った検出方法はほとんど同じです。したがって、免疫沈降とウエスタンブロットの主な違いはその機能です。
