主な違い ELISA と ELFA は、ELISA では発色が陽性サンプルの検出基準ですが、ELFA では蛍光を発することが検出基準です .
ELISA と ELFA は、生体サンプル中のタンパク質、特に抗体と抗原の検出に使用される 2 つの免疫学的方法です。 ELISA は感度の高い方法ですが、ELFA は ELISA よりも感度が高くなります。
対象となる主な分野
1. ELISAとは
– 定義、タイプ、重要性
2. ELFAとは
– 定義、方法、重要性
3. ELISAとELFAの類似点は何ですか
– 共通機能の概要
4. ELISAとELFAの違いは何ですか
– 主な相違点の比較
主な用語
発色基質、ELFA、ELISA、蛍光基質、免疫学的アッセイ、感度
ELISAとは
ELISA (酵素免疫測定法 ）は、酵素反応による発色を利用して生体サンプル中の特定のタンパク質を検出するために使用される固相酵素イムノアッセイの一種です。方法論に基づいて、ELISA には 3 つの主なタイプがあります。直接 ELISA、間接 ELISA、およびサンドイッチ ELISA。
ダイレクト ELISA
直接 ELISA は、非常に単純な ELISA の最初に開発された方法です。ここでは、マイクロタイター プレート (固相) の表面がサンプルでコーティングされます。次に、酵素結合抗体がプレート上の特定のタンパク質と結合します。発色基質の添加により、タンパク質結合抗体の検出が可能です。
間接ELISA
間接 ELISA は、サンプル中の特定のタンパク質を検出するために 2 段階のプロセスを使用する、やや複雑な ELISA 方法です。ここで、最初のステップは、マイクロタイター プレートをサンプルでコーティングし、目的のタンパク質に結合する特定の種類の一次抗体と共にインキュベートすることです。次のステップは、一次抗体に結合する酵素結合二次抗体でこのプレートをインキュベートすることです。その後、発色基質を添加すると、発色によりプレート上の特定のタンパク質を検出できます。
図 1:ELISA の種類
免疫/サンドイッチ ELISA
サンドイッチ ELISA も 2 段階のプロセスです。ここで、最初のステップは、サンプル中の当該タンパク質を一次抗体と二次抗体の間に挟むことです。したがって、最初のステップでは、マイクロタイタープレートは最初に一次抗体でコーティングされますが、サンプルではコーティングされません。次に、プレートをサンプルとともにインキュベートします。第三に、酵素結合二次抗体がプレートに追加されます。この二次抗体は、一次抗体に結合した特定のタンパク質に結合します。最後に発色により、プレート上のタンパク質結合抗体複合体を検出できます。
ELFA とは
ELFA (酵素結合蛍光アッセイ ) は固相酵素イムノアッセイの別のタイプであり、ELISA のような色の代わりに蛍光の発生に関与します。ただし、ELFA の一般的な実験手順は ELISA の手順と似ています。 ELFA の唯一の違いは、発色基質の代わりに発色基質を使用することです。たとえば、ELISA で酵素アルカリホスファターゼに使用される発色基質は p-ニトロフェニルリン酸 (PNPP) です。ただし、ELFA では、同じ酵素アルカリホスファターゼに使用される蛍光発生基質は 4-メチルウンベリフェリルリン酸 (4MUP) です。
さらに重要なことは、ELFA は ELISA よりも感度が高いことです。したがって、ELISAによる抗体の検出にかかる時間と比較して、より短い時間で発生する抗体を検出できます。
ELISA と ELFA の類似点
- ELISA と ELFA は、生物学的サンプル中の特定のタンパク質を検出して定量化するのに役立つ 2 種類の免疫学的アッセイです。
- 両方の実験の基本的な設計は同じです。
- また、どちらも固相酵素免疫測定法 (EIA) です。
- さらに、それらは高スループット、高感度、高速で再現性のある方法です。
ELISA と ELFA の違い
定義
ELISA (酵素結合免疫吸着アッセイ) は、発色基質を使用して溶液中の抗原または抗体を検出および測定するための高感度技術を指し、ELFA (酵素結合蛍光アッセイ) ）は、酵素が発色反応ではなく蛍光を触媒する免疫学的方法を指します。したがって、これが ELISA と ELFA の主な違いです。
検出方法
さらに、ELISA は固相の発色を検出しますが、ELFA は固相の蛍光の発色を検出します。
基質
ELISA で使用される基質は発色性ですが、ELFA で使用される基質は蛍光性です。
感度
ELISA と ELFA のもう 1 つの違いは、ELFA は ELISA よりも 100 倍感度が高いことです。
ウィンドウ期間の長さ
ウィンドウ期間は ELISA の方が長く、ウィンドウ期間は ELFA の ELISA よりも約 5 日短くなります。したがって、これが ELISA と ELFA のもう 1 つの違いです。
結論
ELISA は、特定の抗体の結合によって生物学的サンプル中のタンパク質を検出する免疫学的アッセイの一種です。ここでの検出方法は、酵素反応による発色です。一方、ELFA は、酵素反応による蛍光の発生により、サンプル中の特定のタンパク質の存在を検出する別のタイプのイムノアッセイです。したがって、ELISA と ELFA の主な違いは、酵素反応における基質の種類です。
