グラム陽性細菌の細胞壁には、複雑な多糖であるペプチドグリカンの厚い層が含まれています。一方、グラム陰性菌の細胞壁には、外膜に囲まれたペプチドグリカンの薄い層が含まれています。
グラム染色手順には、クリスタルバイオレット溶液、ヨウ素溶液、アセトン - アルコール溶液、およびサフラニン溶液の連続的な適用が含まれます。クリスタルバイオレットは、グラム陽性菌とグラム陰性菌の両方の細胞壁に浸透する主要な染色です。次に、ヨウ素を添加して結晶紫と複合体を形成し、細胞壁の染色をさらに強化します。アセトン - アルコール溶液は分化剤として機能し、グラム陰性菌の細胞壁を脱色させます。最後に、サフラニンが対比染色として添加され、グラム陰性菌の脱色細胞壁を染色します。
グラム染色は通常、細胞壁構造の違いのために真核生物には適用されません。真菌、植物、動物を含む真核生物は、主にセルロースまたはキチンで構成される細胞壁を持っています。これらの細胞壁成分は、細菌のペプチドグリカン細胞壁と同じようにグラム染色と反応しません。その結果、真核生物は通常、グラム染色を保持せず、グラム染色後に顕微鏡下で見たときに無色に見えます。
グラム染色が通常真核生物に適用されないもう1つの理由は、それらの識別と分化に必要ではないことです。真核生物は、その形態、遺伝的特性、およびその他の特定の細胞構造に基づいて、異なるグループに分類されます。ヘマトキシリンやエオシン染色などのさまざまな染色技術は、一般的に真核細胞を視覚化および分化するために使用されます。
要約すると、グラム染色は、主に細胞壁構造に基づいた細菌の分類と識別に使用されます。細胞壁は細菌の細胞壁とは異なり、代替染色方法を使用して効果的に特定できるため、一般的に真核生物には適用されません。
