1。酵素活性の最小化：
- 多くの酵素、特にプロテアーゼは温度に敏感であり、より高い温度でその活性が増加します。溶解緩衝液と細胞懸濁液を冷たく保持すると、酵素活性が大幅に低下し、タンパク質と核酸の分解が防止されます。これは、無傷のタンパク質を分離したり、高品質のRNAを抽出したりするために特に重要です。
2。保存セルラー成分：
- 細胞膜は脂質で構成されており、より高い温度でより液体になります。 この流動性により、膜の破裂と漏れのリスクが高まり、オルガネラや高分子などの細胞成分が失われます。寒冷条件は膜の完全性を維持し、望ましくない放出を防ぎます。
3。生体分子の分解を減らす：
- ヌクレアーゼ（核酸を分解する酵素）も温度に敏感です。 寒い状態は、溶解中のDNAとRNAを分解から保護し、その活動を最小限に抑えるのに役立ちます。
4。セルラープロセスの減速：
- 細胞の代謝プロセスは、溶解後でも継続します。溶解物を冷たく保つことにより、これらのプロセスを遅くし、細胞成分の分解をさらに最小限に抑え、細胞状態のより正確な表現を確保します。
5。タンパク質凝集の促進：
- 場合によっては、低温は実際に特定のタンパク質の凝集を促進する可能性があります。これは、タンパク質精製や結晶化などの下流の用途に望ましい場合があります。
具体的な考慮事項：
- 使用される特定の温度（0°Cまたは4°Cなど）は、特定の実験と標的生体分子の感度に依存します。
- 溶解緩衝液でのプロテアーゼ阻害剤の使用は、温度であってもタンパク質の分解をさらに最小限に抑えることができます。
要約すると、細胞溶解中に氷の冷却条件を使用することは、細胞成分の完全性を維持し、生体分子の不要な分解を防ぎ、細胞状態のより正確な表現を確保するための重要なステップです。
