1。関心の遺伝子を抽出します
* 制限酵素: これらの酵素は分子はさみのように作用し、特定のDNA配列を認識し、それらの部位でDNA分子を切断します。これにより、目的の遺伝子を含むフラグメントが作成されます。
* ベクトル: これらは、関心のある遺伝子のキャリアとして作用するDNA分子です。 一般的なタイプには、プラスミド(細菌に含まれる小型の円形DNA分子)とウイルスベクター(遺伝物質の供給に使用される修飾ウイルス)が含まれます。
* リガーゼ酵素: これらの酵素は分子接着剤のように作用し、目的の遺伝子をベクターに結合します。
2。 DNAの再結合
* DNAリガーゼ: 上記のように、この酵素は、目的の遺伝子をベクターに結合するために重要です。 DNAフラグメント間の隙間を密封し、安定した組換えDNA分子を作成します。
プロセスを分解しましょう:
1。 DNAの分離: 目的の遺伝子を含むDNAは、その源(たとえば、植物、動物、または細菌細胞)から抽出されます。
2。 DNAの切断: DNAは、正確な配列で切断する特定の制限酵素で処理され、標的遺伝子を含むフラグメントを生成します。
3。ベクトルの準備: 選択したベクター(プラスミドまたはウイルス)も同じ制限酵素で切断され、遺伝子を挿入するための互換性のある部位を作成します。
4。遺伝子とベクターの結合: 遺伝子断片と開いたベクトルが混合されます。 DNAリガーゼは遺伝子とベクターの端を結合し、組換えDNA分子を作成します。
5。変換/トランスフェクション: 組換えDNA分子は、宿主細胞(例:細菌)に導入されます。このプロセスは、変換(細菌の場合)またはトランスフェクション(真核細胞の場合)と呼ばれます。
6。選択と複製: 組換えDNAを含む宿主細胞が選択され、増殖することができ、目的の遺伝子の多くのコピーを生成します。
重要な注意: このプロセスは、遺伝子工学とバイオテクノロジーの基本であり、新しい特性を備えた生物を作成したり、医療および産業用の用途向けに貴重なタンパク質を生産したりすることができます。