1。 DNAフラグメント分析:
* 制限酵素消化: クローニング中に、制限酵素を使用して、特定の配列で関心のあるDNAとベクター(プラスミド)をカットします。これにより、さまざまなサイズのDNAフラグメントが生成されます。
* ゲル電気泳動: 次に、DNAフラグメントは、ゲル電気泳動を使用してサイズに基づいて分離されます。 ゲルマトリックス(通常はアガロース)が使用され、電流が適用されます。より小さなフラグメントは、大きなフラグメントよりも速く、より速く、ゲルを通ります。
* 視覚化: DNAフラグメントは、DNAに結合し、UV光の下で蛍光を発する染料を使用して視覚化されます。これにより、ゲル上のDNAのさまざまなバンドを見ることができ、DNAフラグメントのさまざまなサイズを表すことができます。
2。クローニングで使用:
* 制限ダイジェストの検証: 電気泳動は、制限酵素が正しい部位でDNAを正常に削減し、ベクターがライゲーションのための正しい制限部位を持っていることを保証するのに役立ちます。
* クローンの分析: ライゲーション(ベクターでDNAインサートを結合)後、電気泳動が使用されて、ライゲーションが成功していることを確認します。組換えDNA分子のサイズを元のDNAフラグメントとベクターと比較できます。
* スクリーニングライブラリ: 電気泳動を使用して、クローンのライブラリーのDNAインサートを分析し、目的の挿入物でクローンを識別するのに役立ちます。
要約: 電気泳動は、コアクローンプロセス自体の一部ではありませんが、異なるステップを検証し、クローニング実験が成功することを保証するための重要な分析ツールです。