1。 DNAシーケンス：
* 直接シーケンス： これは最も一般的で簡単な方法です。関心のあるDNA領域は、PCR（ポリメラーゼ連鎖反応）を使用して増幅され、自動化されたシーケンス技術を使用してシーケンスされます。次に、シーケンスを参照シーケンス（通常は野生型または通常のシーケンス）と比較します。シーケンスの違いは、突然変異を示しています。
* 次世代シーケンス（NGS）： これは、数百万のDNAフラグメントを同時にシーケンスできるハイスループットシーケンステクノロジーです。 NGSは、ゲノムの大きな領域の突然変異を検出したり、細胞集団の変異を特定したりするのに特に役立ちます。
2。電気泳動：
* 制限フラグメント長多型（RFLP）： この手法は、特定の配列でDNAを切断する制限酵素を使用します。突然変異が制限部位を変更すると、生成されたDNAフラグメントのサイズが変更されます。これは、ゲル電気泳動を使用して視覚化できます。
* 一本鎖立体構造多型（SSCP）： この手法では、変異を持つ一本鎖DNA分子が異なる方法で折り畳まれているという事実を使用しています。異なる折り畳まれた分子は、ゲル上で異なる移動を行い、変異の検出を可能にします。
3。分子アッセイ：
* 対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチド（ASO）ハイブリダイゼーション： この手法では、特定の対立遺伝子を補完する短いDNAプローブを使用します。変異した対立遺伝子と一致するプローブはDNAにハイブリダイズしますが、野生型対立遺伝子に一致するプローブはそうしません。
* 突然変異特異的プライマーを伴うポリメラーゼ連鎖反応（PCR）： PCRプライマーは、変異した対立遺伝子を特異的に増幅するように設計されています。突然変異が存在する場合、PCR産物は増幅されますが、突然変異がない場合は増幅されません。
4。表現型分析：
* 観察可能な特性の変化： いくつかの突然変異は、色、サイズ、または行動の変化など、生物の表現型の観察可能な変化をもたらします。これらの変更は、突然変異のある個人を識別するために使用できます。
* 機能アッセイ： これには、変異遺伝子によってコードされるタンパク質または酵素の活性をテストすることが含まれます。タンパク質または酵素が非機能的または活性が変化している場合、これを使用して突然変異を特定できます。
5。細胞培養技術：
* 不死化細胞株： 特定の細胞株は研究室で栽培でき、突然変異を研究するために使用できます。これらの細胞株は、細胞の成長、増殖、およびその他の細胞プロセスに対する変異の影響を調査するために使用できます。
* 遺伝子編集技術： CRISPR-CAS9などのツールを使用して、細胞株に特定の変異を導入し、突然変異の効果の研究を可能にします。
6。人口調査：
* 突然変異頻度： 集団の突然変異の頻度を研究することにより、生物学者は特定の疾患または表現型に関連する変異を特定できます。
* 集団遺伝学： 集団遺伝的研究は、時間の経過に伴う変異の進化と、人口の全体的なフィットネスへの影響を追跡できます。
突然変異が発生したかどうかを判断するために使用される方法は、特定のコンテキストと対処されている研究の質問によって異なることに注意することが重要です。複数のアプローチを組み合わせることで、多くの場合、突然変異の存在に関するより堅牢な証拠を提供できます。
