rnaseとは？
RNaseはRNAを分解する酵素です。それらは遍在しています。つまり、次のことを含む、ほぼすべての生物学的サンプルにあります。
* セル： 細胞自体と表面の両方。
* 機器： ガラス製品やソリューションなどの実験装置。
* 空気： 空中RNaseはサンプルを汚染する可能性があります。
RNAの分離にとってRNaseの不活性化が重要なのはなぜですか？
* RNAの完全性の保存： RNaseはRNAを迅速に分解することができ、下流の用途向けに高品質のRNAを取得することが不可能になります。
* 正確な結果： 劣化したRNAは、遺伝子発現分析、マイクロアレイ、シーケンスなどの実験で、誤ったまたは誤解を招く結果につながる可能性があります。
DEPCの仕組み：
DEPCはRNaseの活性部位と反応し、構造を変更し、非アクティブにします。このプロセスは、アルキル化として知られています 。
RNA分離でDEPCを使用する方法：
1。 depcで水を処理： DEPCは通常、水に加えられ、その後、37°Cで数時間インキュベートされ、RNASEの完全な不活性化を確保します。次に、DEPCをオートクレーブして残留DEPCを除去し、RNaseを含まない水のみを残します。
2。ソリューションと機器の処理： DEPCは、ガラス製品、ピペットのチップ、チューブなど、他の溶液や実験装置を処理して、RNase汚染を排除できます。
3。 DEPC処理試薬を使用： 多くのRNA分離キットと試薬には、RNaseのない条件を確保するために、DEPCで前処理されています。
重要なメモ：
* 注意： DEPCは有毒であり、注意して処理する必要があります。適切な個人用保護具を着用し、換気の良いエリアで作業します。
* 代替： RNase阻害剤の使用や市販のRNaseを使用していない試薬の使用など、DEPC治療の代替品が存在します。
* 一貫性の重要性： RNAの完全性を維持するには、RNA分離プロセス全体でDEPCまたは他のRNase不活性化方法を一貫して使用することが重要です。
DEPC治療を通じてRNASEを効果的に不活性化することにより、研究者は高品質のRNAの分離を確保できます。これは、正確で信頼できる実験結果に不可欠です。
