1。遺伝子分離：
* 遺伝子を識別する： 科学者は、最初に挿入したい特定の遺伝子を知っている必要があります。 これには、既知の遺伝子のデータベースを検索したり、実験を行って、望ましい特性の原因となる遺伝子を特定することが含まれます。
* 遺伝子を取得します： 遺伝子は、さまざまなソースから取得できます。
* 別の生物からのクローニング： この遺伝子は、PCR（ポリメラーゼ連鎖反応）などの技術を使用して、異なる生物から増幅（コピー）できます。
* 遺伝子の合成： 遺伝子配列がわかっている場合、ラボで人為的に合成できます。
2。ベクトル準備：
* 適切なベクトルを選択します： ベクターは、遺伝子を細菌細胞に届けるキャリア分子です。一般的なベクターには、プラスミド（小型の円形DNA分子）またはウイルス（バクテリオファージ）が含まれます。
* ベクトルの変更： ベクトルは、目的の遺伝子を挿入できる「制限サイト」と呼ばれる特別なシーケンスを含めるように変更されています。これには、多くの場合、特定の部位でDNAを認識して切断する特定の酵素（制限酵素）でベクターを切断することが含まれます。
3。遺伝子挿入（ライゲーション）：
* 遺伝子とベクターを組み合わせます： 分離された遺伝子と切断ベクターは、DNAリガーゼと呼ばれる酵素の存在下で混合されます。
* ライゲーション： DNAリガーゼは遺伝子とベクターの端を結合し、組換えDNA分子を作成します。
組換えDNA分子が作成されると、次のステップでは、それを細菌（変換）に導入し、新しい遺伝子を首尾よく取り上げた細菌を選択することが含まれます。
