その理由は次のとおりです。
1。目標: 特定の遺伝子(目的の遺伝子)をプラスミドに挿入し、組換えプラスミドを作成したいと考えています。
2。出発点: これを行うには、最初に目的の遺伝子を取得する必要があります。これには次のことが含まれます。
* 遺伝子の識別: これには、既存のデータベースを調査したり、PCRなどの手法を使用してDNAサンプルから遺伝子を増幅したりすることが含まれます。
* 遺伝子の抽出: 同定されると、遺伝子はそのソース(たとえば、細菌細胞、ヒト細胞など)から抽出されます。
組換えプラスミド産生に関与する他のステップ:
1。目的の遺伝子の分離: (すでに議論されています)
2。制限酵素によるプラスミドと遺伝子の消化: これにより、両方のDNAフラグメントに互換性のある粘着性エンドが作成されます。
3。プラスミドへの遺伝子の結紮: 遺伝子とプラスミドは、DNAリガーゼによって結合されます。
4。組換えプラスミドによる細菌の形質転換: 組換えプラスミドは細菌に導入されます。
5。組換えプラスミドを含む細菌の選択: 組換えプラスミドを含む細菌が同定され、分離されます。
6。関心の遺伝子の発現: 組換えプラスミドは細菌に導入され、細菌は関心のある遺伝子を発現します。
これらの手順のいずれかについて詳細が必要な場合はお知らせください!