一般的に制限酵素
* ecori:
*認識サイト:5'-gaattc-3 '
*アクション:GとAの間にDNAを切り、粘着性の端を作成します。
* bamhi:
*認識サイト:5'-GGATCC-3 '
*アクション:GとGの間でDNAをカットし、粘着性の端を作成します。
* hindiii:
*認識サイト:5'-AAGCTT-3 '
*アクション:AとAの間でDNAを切り、粘着性の端を作成します。
* psti:
*認識サイト:5'-CTGCAG-3 '
*アクション:CとGの間でDNAをカットし、粘着性の端を作成します。
* smai:
*認識サイト:5'-CCCGGGG-3 '
*アクション:CとGの間でDNAをカットし、鈍い端を作成します。
制限酵素がどのように機能するか
* 認識サイト: 制限酵素は、認識部位と呼ばれる特定の短いDNA配列を認識して結合します。これらのサイトは通常、長さ4〜8個の塩基ペアです。
* 切断: 結合すると、酵素は認識部位またはその近くでDNAバックボーンをカットします。
* スティッキーエンドとブラントエンド: 一部の酵素は、他のDNAフラグメントに補完的なオーバーハングとベースペアを使用できる、短く、一本鎖のオーバーハングである「粘着性の端」を生成します。他の酵素は、DNAがまっすぐにカットされる「鈍い端」を生成します。
制限酵素の応用
* 遺伝子クローニング: 特定の場所でDNAを切断するために使用され、研究者がクローニングのためにベクトル(プラスミドなど)に遺伝子を挿入できるようにします。
* DNAフィンガープリント: 制限酵素は、識別のための一意のDNAフラグメントパターンを作成するために使用されます。
* ゲノムマッピング: 制限酵素は、制限マップを作成するために使用されます。これは、ゲノム内の制限部位の位置を示しています。
* 遺伝子治療: 制限酵素は、治療目的で遺伝子を修飾するために使用されます。
重要な注意:
利用可能な数百の異なる制限酵素があり、それぞれに独自の認識部位と切断パターンを備えています。制限酵素に関する詳細情報を提供するRebase(http://rebase.neb.com/)のようなデータベースを見つけることができます。