1。培養と観察:
* トリブリビュリン寒天の成長: この特殊な寒天には、トリグリセリドであるトリビュリンが含まれています。脂肪分解性細菌はトリビタイリンを加水分解し、脂肪の分解によりコロニーの周りに明確なハローを生成します。
* 顕微鏡検査: 顕微鏡下で細菌細胞を調べると、細胞内脂質液滴の存在が明らかになります。これは脂肪分解細菌の特徴です。
2。生化学的アッセイ:
* リパーゼ活性アッセイ: このアッセイは、トリグリセリドの加水分解に関与する酵素であるリパーゼの活性を測定します。基質(トリグリセリド)を追加し、多くの場合分光光度法を使用して加水分解速度を測定することが含まれます。
* エステラーゼ活性アッセイ: 脂肪分解細菌もエステラーゼを産生し、エステルを分解します。リパーゼアッセイと同様に、これらのアッセイはエステル加水分解の速度を測定します。
3。分子技術:
* pcr: PCRは、細菌ゲノムのリパーゼまたはエステラーゼをコードする遺伝子の存在を検出するために使用できます。これは、脂肪分解活性の強力な証拠を提供します。
* DNAシーケンス: 細菌ゲノムのシーケンスは、脂肪分解活性に関連する遺伝子の存在を明らかにすることができ、より包括的な分析を可能にします。
4。実用的なアプリケーション:
* 牛乳の腐敗: 脂肪分解性細菌は、乳脂肪の加水分解による牛乳の酸性度の原因です。牛乳におけるそれらの存在は、酸味やオフオーダーのような兆候を観察することによって評価できます。
* 食品産業: 脂肪分解性細菌は、チーズなどの特定の発酵食品の生産に役割を果たします。また、トリグリセリドからのバイオ燃料の生産にも使用できます。
重要な考慮事項:
* 特異性: 異なる脂肪分解細菌には、基質の好みが異なる場合があります。特定のトリグリセリドでより活性が高い人もいれば、より広い範囲の活動を持っている人もいます。
* 環境要因: 脂肪分解性細菌の成長と活性は、温度、pH、栄養素の入手可能性などの要因に影響される可能性があります。
これらの方法の組み合わせを使用することにより、細菌が脂肪分解であるかどうかを効果的に判断し、特定の用途の可能性を評価できます。