組換えDNAがどのように転写されるかは次のとおりです。
1。ベクトル選択: ベクターは、組換えDNAを宿主細胞に届けるキャリアです。一般的なベクトルは次のとおりです。
* プラスミド: 細菌に自然に見られるDNAの円形の断片。
* 細菌: 細菌に感染するウイルス。
* ウイルス: RDNAを真核細胞(動物や植物細胞など)に運ぶように修正できます。
* cosmids: プラスミドとバクテリオファージの特徴を組み合わせたハイブリッドベクター。
2。 rdnaのベクトルへの挿入: 目的の遺伝子(RDNA)は、特定の酵素を使用してベクターに挿入されます。
* 制限酵素: 特定のシーケンスでDNAを切り、フラグメントを結合するための「粘着性の端」を作成します。
* リガーゼ酵素: RDNAの粘着性端とベクターDNAに結合し、組換え分子を形成します。
3。変換またはトランスフェクション: 組換えベクターは宿主細胞に導入されます。
* 変換: バクテリアが環境から外来DNAを取り上げるプロセス。
* トランスフェクション: エレクトロポレーション、脂肪分解、またはウイルス形質導入などの技術を使用して、真核細胞に外来DNAを導入するプロセス。
4。選択と増幅: 組換えベクターを正常に取り上げた細胞は、特定のマーカー(抗生物質耐性遺伝子など)を使用して選択されます。次に、これらの細胞は培養で成長し、rDNAを増幅します。
転送方法の例:
* エレクトロポレーション: 細胞膜に短い電気パルスが適用され、組換えDNAの侵入を可能にする一時的な細孔が作成されます。
* lipofection: 組換えDNAは脂質小胞でカプセル化され、細胞膜と融合し、DNAを細胞質に送ります。
* ウイルス形質導入: 組換えDNAはウイルスにパッケージ化され、宿主細胞に感染してDNAを供給します。
重要な考慮事項:
* 効率: 転送プロセスの効率は、ベクトル、ホストセル、および使用される方法によって異なります。
* 特異性: 組換えDNAが正しく発現するように、標的細胞タイプを慎重に選択する必要があります。
* 安全性: RDNAが他の生物に拡散する可能性や意図しない結果を引き起こす可能性について懸念があります。
要約、 組換えDNAの移動は、適切なベクトルを選択し、rDNAをベクターに挿入し、組換えベクターを宿主細胞に導入し、rDNAを含む細胞を選択および増幅することを含む複雑なプロセスです。これらの技術は、医学、農業、研究の用途に不可欠です。