1。染料除外アッセイ：
* トリパンブルー除外： これは古典的な方法です。生きている細胞には無傷の細胞膜があり、色素の入りを防ぎますが、死んだ細胞は膜を妥協して、色素が細胞質青に入り、染色できるようにします。
* ヨウ化プロピジウム（PI）除外： トリパンブルーと同様に、PIは死んだ細胞に入るが生細胞ではない蛍光色素です。
2。代謝活性アッセイ：
* mttアッセイ： この比色アッセイは、生細胞におけるミトコンドリア酵素の活性を測定します。生細胞は、MTT（黄色のテトラゾリウム塩）をコルマザンに減らします。これは、定量化できる紫色のホルマザン製品です。
* Resazurin還元アッセイ： この蛍光ベースのアッセイは、ライブ細胞によるレゾルフィン（非常に蛍光）へのレサズリン（非蛍光）の還元を測定します。
* ATPアッセイ： このアッセイは、生細胞に見られる重要なエネルギー分子であるアデノシン三リン酸（ATP）のレベルを測定します。
3。 DNA染色：
* hoechst 33342： この染料はDNAに結合し、生細胞と死細胞の両方を染色するために使用されます。 しかし、生きている細胞は、死んだ細胞と比較して、より明確な青色蛍光を示します。
* dapi： Hoechstと同様に、DapiはDNAを染色する蛍光色素です。 生きた細胞は、死んだ細胞と比較して、より明るく強い青色の蛍光を示します。
4。細胞周期分析：
* フローサイトメトリー： この技術は、レーザーと蛍光色素を使用して細胞のDNA含有量を分析し、細胞周期の異なる段階で細胞を区別できるようにします。死んだ細胞はしばしば断片化されたDNAを示し、特定の染色パターンによって識別できます。
5。その他のテクニック：
* カルセインAM/エチジウムホモディマー-1（ETHD-1）アッセイ： このアッセイは、2つの蛍光色素を組み合わせています。非蛍光分子であるカルセインAMは、生細胞の活性エステラーゼによって緑色の蛍光色素に変換されます。赤い蛍光色素であるETHD-1は、膜が妥協した死んだ細胞のみに入ります。
* 自動化されたシステムを使用したセルカウント： 一部の自動セルカウンターは、形態と内部の特徴に基づいて、イメージングおよび分析アルゴリズムを採用して生きているセルと死んだセルを区別しています。
重要な考慮事項：
* 精度： メソッドの選択は、セルタイプ、実験目標、および利用可能なリソースに依存します。特定のアプリケーションに対して正確で信頼できるメソッドを選択することが重要です。
* 特異性： 一部の技術は、特定の種類の細胞死（例えば、アポトーシスや壊死）に対してより具体的です。
適切な定量化技術を採用することにより、研究者は培養中の細胞の生存率を正確に評価できます。これは、細胞プロセス、薬物の有効性、さまざまな実験条件の影響を理解するために不可欠です。
