基本を理解する
* tris-hcl: これは、トリス(トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン)と塩酸(HCl)を組み合わせて作られた緩衝液です。
* 10 mm: これは10ミリモラであり、溶液の濃度を示しています。これは、溶液1リットルあたり10ミリモルのTris-HClがあることを意味します。
材料
* Trisベース(フリーベース): 特定の量のトリスベースパウダーが必要です。
* 塩酸(HCl): HClの濃縮溶液(通常は1Mまたは12M)が必要です。
* 脱イオン水: 精度のために高品質の脱イオン水を使用してください。
* 段階的なシリンダー: 量を正確に測定するため。
* 計量スケール: トリスベースパウダーの重量を正確に計量するため。
* pHメーター(オプション): 正確なpH調整用。
計算
1。 TRISベースの分子量: TRISベースの分子量は121.14 g/molです。
2。必要なTRISベースの質量を計算します: 次の式を使用して、TRISベースの質量を計算します。
*質量(g)=(濃度(mm)×分子量(g / mol)×体積(L)) / 1000
* 1リットル(1000 ml)の10 mm溶液の場合:
*質量=(10 mm×121.14 g / mol×1 l) / 1000
*質量=1.2114 g
手順
1。 Trisベースの重量: 計算されたTRISベースの量(1リットルで1.2114 g)を慎重に計量します。
2。水にTRISベースを溶解: TRISベースを適切な容器に約800 mLの脱イオン水に加えます。粉末が完全に溶けるまでかき混ぜます。
3。 ph:を調整します
* pHメーターを使用: pHメーターでpHを絶えず監視しながら、濃縮HClをTRIS溶液に滴下します。 PHを目的の値に調整します(通常、TRIS-HCLバッファーの場合は約7.5〜8.5)。
* pHメーターなし: 約0.5 mLの濃縮HClを加えます(1 L溶液の場合)。溶液をかき混ぜ、pH紙を使用してpHを確認します。目的のpHが達成されるまで、それに応じてHCLボリュームを調整します。
4。ソリューションを最終ボリュームに持ち込みます: pHを調整した後、脱イオン水を加えて、溶液の総体積を1リットルにします。
5。滅菌: 必要に応じてオートクレーブによって溶液を滅菌します。
重要なメモ
* pH調整: 目的のpHに到達するために必要なHClの正確な量は、TRISベースの純度とHCl溶液の濃度によってわずかに異なります。
* 精度: 正確な計量スケールと段階的なシリンダーを使用して、正確な準備を確保します。
* ストレージ: TRIS-HCL溶液を室温または冷蔵庫に保管します。
* 貯蔵寿命: TRIS-HCLソリューションは一般的に賞味期限が良好ですが、劣化の兆候(たとえば、変色、曇り)をチェックすることが常に最適です。
質問があるか、TRIS-HCLソリューションの異なる濃度または量を準備するかどうかを教えてください。喜んで助けて!