1。原則:
*硫酸アンモニウム(nh₄)₂so₄は非常に溶けやすい塩です。タンパク質を含む溶液に添加すると、溶液のイオン強度が増加します。
*このイオン強度の増加は、水分子とタンパク質の表面との相互作用を破壊し、タンパク質を囲む水和シェルを弱めます。
*その結果、タンパク質分子は溶解性が低くなり、凝集する傾向があり、沈殿 。
2。臨床検査でのアプリケーション:
* タンパク質精製: 飽和硫酸アンモニウムは、分画タンパク質の一般的な方法です 溶解度に基づいています。硫酸アンモニウムの濃度を慎重に調整することにより、特定のタンパク質を選択的に沈殿させ、他のタンパク質を溶液中に残します。これは、さらなる分析のために標的タンパク質を精製するのに役立ちます。
* 酵素活性: 硫酸アンモニウム沈殿を使用して、酵素を濃縮したり、安定性を高めたり、阻害剤を除去したりすることができます。これは、酵素動態と機能の研究に特に役立ちます。
* 免疫沈降: この方法では、抗体を使用して、複雑な混合物から特定のタンパク質を捕捉します。硫酸アンモニウムは、抗体を導入する前に混合物に加え、標的タンパク質の濃度を減らし、免疫沈降プロセスの効率を改善することができます。
3。利点と考慮事項:
* 比較的安価で容易に入手できます: 硫酸アンモニウムは、タンパク質沈殿のための費用対効果の高い試薬です。
* タンパク質に優しい: 他の降水方法と比較して、硫酸アンモニウムは一般にタンパク質ではあまり厳しくなく、変性のリスクが低下します。
* 高塩濃度: 効果的ですが、高塩濃度は下流のアプリケーションに影響を与える可能性があります。最適な酵素活性またはタンパク質分析のために、除去または調整する必要がある場合があります。
要約:
飽和硫酸アンモニウムは、特にタンパク質精製、酵素活性研究、および免疫沈降において、実験室試験における強力なツールです。溶解度に基づいてタンパク質を沈殿させる能力は、目的のタンパク質を分離および濃縮するための貴重な方法を提供します。ただし、この手法を使用する際には、高塩濃度と潜在的な下流の影響に注意することが重要です。