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有糸分裂染色体研究でアセトカルミンが使用される理由

生体物質の染色には、さまざまな染色剤が使用されます。染色は生体サンプル中の特定の物質と反応し、その物質に特定の色を与えます。 アセトカルミンは、染色体内の核酸のデモンストレーションに使用される染色剤です。アセトカルミンが核酸染色剤としてより適している理由は他にもいくつかあります。 それらについては、この記事で説明します。

対象となる主な分野

1.ステインとは
– 汚れの定義、種類
2.アセトカルミンとは
– 定義、特性、準備
3.有糸分裂染色体研究でアセトカルミンが使用される理由
– アセトカルミンの準備、使用

重要な用語:アセトカルミン、染色体、ホルムアルデヒド、加水分解、有糸分裂染色体研究、染色

染色とは

染色は、生体サンプルの顕微鏡研究で顕微鏡下での生体サンプルのコントラストを強調するために使用される技術です。特定の細胞集団、細胞小器官、DNA、タンパク質、炭水化物、脂質などの生体組織の構造を強調します。汚れは、合成化学物質または植物や動物に由来する天然化学物質のいずれかです。染色方法は以下のとおりです。

<オール>
  • 単一染色 – 単一染色では、生物学的サンプル全体に単一の色を与えるために 1 つの染色のみが使用されます。
  • 二重染色 – 二重染色では、特定の細胞小器官または特定の領域を染色するために 2 つの染色が使用されます。
  • 多重染色 – 多重染色では、サンプル中の細胞小器官などの成分を特異的に染色するために、2 つ以上の染色が使用されます。
  • アセトカルミンとは

    カルミンは、Coccus cacti として知られる昆虫から調製される塩基性染料です。 .アセトカルミンは、カルミンと氷酢酸を混合することによって生成されます。 これは、有糸分裂のさまざまな段階でスーパー コイル状の染色体を可視化するために使用される DNA 特異的染色です。

    アセトカルミン染色液の調製

    <オール>
  • 10 g のカルミンを 1 L の 45% 氷酢酸に溶解します。
  • アルミニウム顆粒を加え、24 時間還流します。
  • 濃い色のボトルにろ過し、4°C で保存します。
  • 塩化第二鉄を加えることで、染色を強めることができます (% アセトカルミン 100 mL あたり 10 % 塩化第二鉄溶液 5 mL を加えます)。
  • 有糸分裂染色体研究でアセトカルミン染色が使用される理由

    一般に、アセトカルミンは単一染色で使用される染料です。核と細胞質の両方を染色します。細胞質を無色に保ちながら染色体を染色するには、生物学的サンプルを最初にホルムアルデヒドで処理し、次に正しい加水分解時間で 60 °C で HCl で加水分解する必要があります。最後に、アセトカルミンで治療できます。アセトカルミンは、弱酸性条件 (pH 4 ~ 5) で大きな色素凝集体を生成します。アセトカルミン染色によるタマネギの根の有糸分裂の様子を 図 1 に示します。 .

    図 1:タマネギの根の有糸分裂

    ただし、アセトカルミンは、アセトオルセインなどの他の核酸染色剤よりも毒性が弱いです。また、他の種類の染みよりも安価です。

    結論

    染色は、サンプル内の特定の生物学的成分のコントラストを強調するために顕微鏡研究で使用されます。アセトカルミンは、細胞内の核酸を染色するために使用される染色剤です。アセトカルミンは細胞質とは別に染色体を特異的に染色するため、有糸分裂研究で染色体を視覚化するために使用できます。

    参照:

    1.「アセトカルミン染色」カンザス州立大学、こちらから入手できます。
    2.J. A. Rattenbury (2009) アセトカルミンによる核小体物質の特異的染色、染色技術、こちらから入手可能。

    画像提供:

    1.「タマネギの根の有糸分裂」 静的dによる – Commons Wikimedia経由の自作(CC BY-SA 3.0)


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