1。ヒトインスリン遺伝子の分離：
* 遺伝子の識別： 研究者は、最初にヒトインスリンをコードする正確なDNA配列を特定する必要がありました。 これには、ヒトゲノムの研究とインスリンタンパク質の構造を理解することが含まれていました。
* 遺伝子のクローニング： 遺伝子が同定されると、制限酵素やプラスミドなどの技術を使用して、ヒトDNAからインスリン遺伝子を切り取り、プラスミドと呼ばれる小さな円形のDNAに挿入しました。これにより、組換えDNA分子が生成されました。
2。適切な細菌宿主の選択：
* e。労働者としての大腸菌： 細菌 * Escherichia coli *（大腸菌）は、宿主生物として選択されました。よく研究され、簡単に操作され、迅速に細菌を再現するため、大規模な生産に最適です。
3。遺伝子を細菌に挿入する：
* 変換： ヒトインスリン遺伝子を含む組換えプラスミドを大腸菌細胞に導入しました。変換と呼ばれるこのプロセスは、細菌がプラスミドを吸収する条件の作成を伴いました。
4。トランスジェニック細菌の選択：
* 抗生物質耐性： プラスミドにはしばしば抗生物質耐性の遺伝子が含まれていました。これにより、研究者はプラスミドを正常に取り上げた細菌を簡単に識別することができました。それらは抗生物質の存在下で細菌を栽培し、プラスミドを持つ細菌のみが生存します。
5。インスリン遺伝子の発現：
* プロモーターと規制： プラスミドは、ヒトインスリン遺伝子が大腸菌内で発現（オンになっている）ように設計されています。これには、プロモーター配列 - 細菌機械にインスリン遺伝子の読み取りと転写を開始するよう指示するDNA領域を含むことが含まれます。
6。インスリンの生産と精製：
* 大規模な発酵： トランスジェニック大腸菌菌は大きな発酵タンクで栽培され、大量のインスリンを産生できるようにしました。
* 精製： 発酵後、細菌によって生成されたインスリンは、細菌成分の残りの部分から精製する必要がありました。これには、クロマトグラフィーやろ過などのさまざまな手法が含まれていました。
重要な注意： これは単純化された概要です。このプロセスには、多くの技術的な詳細、反復、課題が含まれており、多くの素晴らしい科学者がその成功に貢献しました。
