1。制限酵素:
* 関数: 分子はさみのように機能し、制限部位と呼ばれる特定の配列でDNAを切断します。
クローニングにおける * 役割:
* 関心の遺伝子を切断する: 彼らは、ドナー生物から目的の遺伝子を含むDNAを切断しました。
* ベクトルの切断: それらは、特定の部位でベクターDNA(プラスミドなど)を切断し、遺伝子を挿入するためのスペースを作成します。
2。 DNAリガーゼ:
* 関数: 分子接着剤のように機能し、2つのDNAフラグメントを結合します。
クローニングにおける * 役割:
* 遺伝子をベクトルに挿入する: 遺伝子とベクターが同じ制限酵素で切断された後、DNAリガーゼが2つのピースを結合し、組換えDNA分子を作成します。
3。逆転写酵素:
* 関数: RNA分子(cDNA)のDNAコピーを作成します。
クローニングにおける * 役割:
* RNAからのクローニング遺伝子: タンパク質を産生する遺伝子など、RNAとして発現する遺伝子をクローン化するためには不可欠です。逆転写酵素はRNAをDNAに変換し、それをベクターに挿入できます。
4。ポリメラーゼ連鎖反応(PCR):
* 関数: 特定のDNA配列を増幅します。
クローニングにおける * 役割:
* 遺伝子の複数のコピーの作成: PCRにより、科学者は、クローニングを成功させるために、関心のある遺伝子の十分なコピーを生成することができます。
* クローンのスクリーニング: PCRは、目的の遺伝子を含むクローンを識別するために使用できます。
5。他の酵素:
* DNAポリメラーゼ: PCRで新しいDNA鎖を合成するために使用されます。
* exonucleases: DNA鎖の端からヌクレオチドを除去します。これは、クローニングのためにDNAを準備するためによく使用されます。
* エンドヌクレアーゼ: DNAフラグメントを変更するのに役立つ特定の内部シーケンスでDNAを切断します。
全体: 酵素は、クローニングにおけるDNAの正確な操作に不可欠なツールです。科学者は特定の遺伝子を分離し、それらをベクターに挿入し、望ましいDNA配列を増幅し、遺伝子のコピーを作成し、最終的に異なる生物で表現できるようにします。