ビッグ4:a、t、g、およびc(ヌクレオチド)
* アデニン(a)、チミン(t)、グアニン(g)、シトシン(c): これらはDNAの構成要素です。 PCR中、ポリメラーゼ酵素はこれらの遊離ヌクレオチドを使用して、標的DNA配列のコピーである新しいDNA鎖を作成します。 それらをあなたの遺伝コードを綴る「文字」と考えてください。
その他の必須コンポーネント
1。 DNAポリメラーゼ: これがショーのスターです。これは、既存のDNAテンプレートを読み取り、新しいヌクレオチドを追加してDNA配列の新しいコピーを作成する酵素です。
2。プライマー: 標的DNAの特定の領域に結合する一本鎖DNAの短い部分。それらは、ポリメラーゼが新しいDNA鎖を構築するための出発点として機能します。ポリメラーゼにコピーを開始する場所を伝える「ブックマーク」と考えてください。
3。バッファ: このソリューションは、ポリメラーゼが効果的に機能するための適切なpHおよびイオン環境を維持するのに役立ちます。酵素が快適に感じ、仕事を遂行するための適切な条件を作成するようなものです。
4。マグネシウムイオン(Mg2+): これらのイオンは、ポリメラーゼが機能するために不可欠です。ポリメラーゼがDNAに結合し、ヌクレオチドが成長するDNA鎖に付着するのを助けます。それらをすべてをまとめる「接着剤」と考えてください。
5。 dntps(デオキシヌクレオチド三リン酸): これらは、DNAの実際の構成要素です。それらは、ポリメラーゼが新しいDNA鎖を構築するために使用する個々の「文字」です。それらは本質的にヌクレオチドと同じですが、「三リン酸塩」です。つまり、DNA合成プロセスに燃料を供給するために使用される余分なエネルギーを運びます。
なぜマスターミックス?
* 利便性: これは、ワンストップショップであり、事前に混合されたソリューションであり、各コンポーネントを個別に測定して追加する必要性を排除します。これにより、時間を節約し、エラーのリスクを減らします。
* 一貫性: すべてのコンポーネントを事前に組み合わせることにより、各PCR反応が同じ濃度の試薬を持ち、より一貫した結果をもたらすことを確認します。
* 最適化: 多くのマスターミックスは、特定のアプリケーションに対して事前に最適化されています。つまり、最適なPCRパフォーマンスのために適切な濃度の試薬があります。
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