1。抗生物質耐性による選択：
* それがどのように機能するか： ほとんどのプラスミドは抗生物質耐性遺伝子を運びます。細菌をプラスミドで形質転換すると、プラスミドを取り上げた細菌のみが抗生物質を含む培地で生存します。
* 例： 一般的な抗生物質耐性遺伝子は、アンピシリン抵抗性（AMPR）です。プラスミドにAMPR遺伝子が含まれている場合、アンピシリンを含む培地に細菌を板化できます。プラスミドを含む細菌のみが成長しますが、それのない細菌は死にます。
2。青白スクリーニング：
* それがどのように機能するか： この方法では、基質を分解して青色を作成する酵素をコードするLACZ遺伝子を使用します。プラスミドには、破壊された（不活性化）があるLACZ遺伝子のコピーが含まれています。組換えプラスミドは、あなたの関心のある遺伝子の挿入により、そのLACZ遺伝子が破壊されます。非関節剤プラスミドで形質転換された細菌は酵素を生成し、基質を含む培地に青く見えますが、組換えプラスミドとともに形質転換された細菌は酵素を生成せず、白に見えます。
* 利点： この方法により、組換え剤の迅速かつ簡単な識別が可能になります。
* 注： この方法では、「laczベクター」と呼ばれる特定のタイプのプラスミドが必要です。
3。コロニーPCR：
* それがどのように機能するか： この方法では、細菌のコロニーでPCRを実行して、元のプラスミドには存在しない特定のDNA断片を増幅します。
* 利点： この方法は非常に特異的であり、挿入された遺伝子の存在を確認できます。
* 注： この方法には、目的の遺伝子とPCRサーモサイクラーの特定のプライマーが必要です。
4。制限酵素消化：
* それがどのように機能するか： この方法では、特定の制限酵素でプラスミドDNAを消化することが含まれます。組換えプラスミドは、挿入された遺伝子のため、元のプラスミドと比較して異なる制限パターンを持っています。
* 利点： この方法では、挿入された遺伝子の存在とその方向を確認できます。
* 注： この方法では、プラスミドの制限部位と関心のある遺伝子の知識が必要です。
5。蛍光マーカー：
* それがどのように機能するか： 一部のプラスミドには、蛍光顕微鏡下で形質転換された細胞を識別するために使用できる蛍光タンパク質（GFPなど）が含まれています。
* 利点： この方法は非常に視覚的であり、変換された細胞を簡単に識別できるようになります。
* 注： この方法では、蛍光フィルターを備えた顕微鏡が必要です。
6。ウエスタンブロッティング：
* それがどのように機能するか： この方法は、目的の遺伝子のタンパク質産物を検出するために使用できます。
* 利点： この方法では、遺伝子が正常にクローン化され、発現したことを確認できます。
* 注： この方法には、目的のタンパク質に特異的な抗体が必要です。
組換え細胞を識別するための最良の方法は、特定のプラスミドと目的の遺伝子に依存します。メソッドの組み合わせを使用して、最も正確な結果を確保できます。
