1。サンプルの準備:
* サンプルを取得します: 観察したい細菌を含むサンプルを収集します。これは、培養、綿棒、または生物学的液からのものである可能性があります。
* ウェットマウントを準備:
* クリーンスライド: きれいなガラス顕微鏡スライドを使用し、スリップをカバーします。
* サンプルの追加: 細菌の懸濁液または培養物をスライドの中央に置きます。
* 液体を追加: サンプルに適切な取り付け媒体をドロップします。これは:
* 水: 簡単な観察用。
* 生理食塩水溶液: 細菌細胞に対する等張性、浸透圧ストレスを最小限に抑えます。
* 栄養スープ: 成長して分裂する細菌を観察するため。
* カバースリップ: カバースリップを滴にそっと下げ、気泡が閉じ込められないようにします。
* シール(オプション): 長期的な観察のために、蒸発を防ぐために、石油ゼリーまたはマニキュアでカバースリップの縁を密封することができます。
2。顕微鏡のセットアップ:
* Brightfield Microscopy: これは、生きている細菌観察の最も一般的なタイプです。
* 目的レンズ: 高出力目的レンズ(40倍または100倍)を選択します。
* コンデンサー: コンデンサーを調整して、最適な照明を提供します。
* 光源: 過熱してバクテリアの損傷を防ぐために、光の強度を調整します。
3。観察:
* フォーカス: サンプルに顕微鏡を注意深く焦点を合わせます。
* 観察: 形態(形状)、サイズ、運動性(動き)について細菌を調べます。
* フォーカスを調整: 細菌のさまざまな平面の明確なビューを得るために、焦点を刻む必要があるかもしれません。
4。考慮事項:
* 温度制御: 細菌の成長に適した温度で顕微鏡段階を保ちます。
* 酸素レベル: 好気性細菌の適切な酸素化を確保します。
* 期間: ストレスと細胞死を最小限に抑えるために、バクテリアを短期間観察します。
* 特別なテクニック: 特定のアプリケーションでは、以下を使用できます。
* 相コントラスト顕微鏡: 染色されていない細菌を見るためのコントラストを改善します。
* ダークフィールド顕微鏡: 暗い背景に対して細菌を強調します。
* 蛍光顕微鏡: 蛍光標識された細菌の視覚化が可能になります。
5。安全上の注意事項:
* 手袋: 汚染を防ぐために、細菌サンプルを処理するときは手袋を着用してください。
* 消毒剤: 使用後、消毒剤で顕微鏡とすべての機器を徹底的に清掃します。
* 処分: 実験室の安全ガイドラインに従って、使用済みのスライドとサンプルを適切に処分します。
重要なメモ:
* 培地: 文化から細菌を観察している場合、メディアがその成長に適していることを確認し、文化が適切な成長段階にあることを確認してください(例:対数段階)。
* 染色: 染色は一般に固定細菌に使用されますが、いくつかの汚れは生きた細菌で使用できます。ただし、これらの汚れは細菌の運動性に影響を与える可能性があり、すべての用途に適していない場合があります。
覚えておいてください: 生きている細菌の顕微鏡検査では、観察と細菌の生存率を維持することとの慎重なバランスが必要です。これらのガイドラインに従うことにより、高品質の画像を取得し、生きている細菌の動的な世界を理解する可能性を高めることができます。