1。コレステロールエステル加水分解:
- コレステロールエステラーゼ(CE) コレステロールエステルを遊離コレステロールと脂肪酸に加水分解します。
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コレステロールエステル + H2O→コレステロール +脂肪酸
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2。コレステロール酸化:
- コレステロールオキシダーゼ(CHOD) 遊離コレステロールを酸化して、Cholest-4-en-3-および過酸化水素(H2O2)に酸化します。
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コレステロール + O2→Cholest-4-en-3-One + H2O2
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3。ペルオキシダーゼ反応:
- ペルオキシダーゼ(POD) H2O2と発色基質の間の反応を触媒します 4-アミノフェナゾン(4-AP) 、フェノールの存在下で、通常フェノール4-アミノ酸ピリン(PAP) 。これにより、色付きのキノニミン染料が形成されます。
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H2O2 + 4-AP + PAP→キノニミン染料 + H2O
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キーポイント:
* 結合反応: 反応は結合されており、1つの反応の積が次の反応の基質として機能します。これにより、色付き製品の形成が初期コレステロール濃度に直接比例することが保証されます。
* 分光光度測定: 色付き製品の強度は、特定の波長で分光光度計を使用して測定されます。吸光度はコレステロール濃度に直接比例します。
* キャリブレーション: この方法では、吸光度の読み取り値をコレステロール濃度に関連付けるために、既知のコレステロール標準を使用したキャリブレーション曲線が必要です。
CHOD-PAPメソッドの利点:
* 高感度と精度
* 比較的単純で迅速
* 広く利用可能で標準化
chod-papメソッドの短所:
* 脂肪血症(高トリグリセリドレベル)および溶血の影響を受ける可能性があります
* 特殊な試薬と機器が必要です
全体として、CHOD-PAP法は、血液中のコレステロール値を測定するための信頼性が高く正確な方法です。臨床研究所で広く使用されており、コレステロール測定のゴールドスタンダードと考えられています。