1。疎水性相互作用:
*タンパク質は通常、水分子と水分子結合を形成する親水性(水性)グループのために水に溶けます。
*ただし、それらには、一緒にクラスター化する傾向がある疎水性(水を飼う)グループも含まれています。
2。硫酸アンモニウムの影響:
*硫酸アンモニウムをタンパク質溶液に添加すると、水分子と相互作用し、タンパク質の親水基から効果的にそれらを剥がします。
*タンパク質の周りの水分補給シェルのこの破壊は、疎水性グループを暴露します。
3。集約と降水量:
*硫酸アンモニウムの濃度が増加すると、異なるタンパク質分子の疎水性基がより露出し、互いに相互作用し、凝集につながります。
*最終的に、これらの凝集体は十分に大きく成長し、不溶性になり、溶液から沈殿します。
降水に影響する要因:
* タンパク質濃度: タンパク質濃度が高いほど、降水のために硫酸アン酸アンモニウム濃度が必要です。
* タンパク質タイプ: 異なるタンパク質は、さまざまな程度の疎水性を持ち、硫酸アンモニウムの沈殿に異なる感受性をもたらします。
* ph: 溶液のpHは、タンパク質の電荷と硫酸アンモニウムとの相互作用に影響を与える可能性があります。
* 温度: より高い温度は一般にタンパク質溶解度を高め、降水のためにより高い硫酸アンモニウム濃度を必要とします。
硫酸アンモニウムの応用沈殿:
* タンパク質精製: これは、複雑な混合物からタンパク質を集中し、部分的に精製するための一般的な手法です。
* 結晶化: 硫酸アンモニウムは、構造研究に重要なタンパク質結晶化を促進するために使用できます。
硫酸アンモニウムの使用の利点:
*比較的安価で容易に入手できます。
*一般的にタンパク質への非自然化は、ネイティブ構造を破壊しないことを意味します。
*タンパク質特性に基づいた選択的降水量を可能にします。
考慮事項:
*各特定のタンパク質と望ましい結果の硫酸アンモニウム濃度を最適化することが重要です。
*沈殿物には、標的タンパク質以外の他の分子が含まれている場合があり、さらに精製ステップが必要です。
*一部のタンパク質は、高塩濃度に敏感である可能性があります。
結論として、硫酸アンモニウム沈殿は、高塩濃度の存在下での疎水性相互作用と溶解度の違いを利用することにより、タンパク質を分離および精製するための貴重な手法です。