1。ジスルフィド結合の減少：
* タンパク質精製と分析： DTTはタンパク質内でジスルフィド結合を破壊し、これはシステイン残基間に形成される共有結合です。これは重要です：
* タンパク質の展開と変性： 電気泳動などの技術のサイズと電荷に基づいてタンパク質を分離することができます。
* タンパク質の再飽和度： ジスルフィド結合を破壊することにより、DTTはタンパク質の適切な折りたたみを促進します。
* タンパク質溶解度の向上： 多くの場合、還元されたタンパク質はより溶けやすく、処理して分析しやすくなります。
* タンパク質凝集の防止： DTTは、タンパク質を縮小状態に保つのに役立ち、精製と貯蔵中の凝集を最小限に抑えます。
* 酵素と抗体の変更： DTTは、酵素および抗体内のジスルフィド結合を減らし、その活性と結合特性に影響を与えるために使用できます。
* DNAおよびRNA操作： DTTは、制限酵素やリガーゼなどのDNAおよびRNA操作に使用される酵素のジスルフィド結合を減らすためにも使用されます。
2。酸化から保護する：
* 試薬とソリューションの安定化： DTTは、酸化剤や緩衝液などの敏感な化合物を酸化から保護できます。
* 細胞培養媒体の維持： DTTを細胞培養媒体に追加して、必須成分の酸化を防ぎ、細胞生存率を維持できます。
3。その他のアプリケーション：
* 免疫沈降： DTTは、抗体抗原相互作用におけるジスルフィド結合を減らし、免疫沈降の効率を高めることができます。
* プロテオミクス研究： DTTは、2Dゲル電気泳動や質量分析など、さまざまなプロテオミクス技術に不可欠です。
* 顕微鏡： DTTは、ジスルフィド結合を減らし、サンプル調製を強化するために電子顕微鏡で使用できます。
作用メカニズム：
DTTは、電子を寄付することによりジスルフィド結合を減らし、その過程で酸化します。酸化されたDTTは、比較的安定して不活性な二量体を形成します。この反応は可逆的ですが、DTTは強力な還元剤であるため、平衡は標的分子の還元状態を好みます。
DTTの利点：
* 高還元電力： DTTは強力な還元剤であり、ジスルフィド結合の破壊に効果的です。
* 水溶性： DTTは水に簡単に溶解するため、さまざまな水溶液での使用に適しています。
* 安定性： DTTは、室温で酸素の存在下で比較的安定しています。
制限：
* 毒性： DTTは高濃度で有毒である可能性があるため、注意して使用することが重要です。
* 反応性： DTTは他の分子と反応する可能性があるため、特定の実験で他の試薬との互換性を考慮することが重要です。
全体として、DTTはさまざまな科学分野で多目的で不可欠な試薬です。ジスルフィド結合を減らす能力は、タンパク質の精製、分析、操作のための貴重なツールになります。
