分光光度計のキャリブレーション:ステップバイステップガイド
分光光度計は、サンプルを介した光の吸光度と透過率を測定するための不可欠なツールであり、化学、生物学、医学などの分野で貴重な情報を提供します。信頼できる正確な測定を確保するには、正確なキャリブレーションが重要です。プロセスの内訳は次のとおりです。
1。波長キャリブレーション:
* 標準の使用: これは最も一般的な方法です。既知の波長(たとえば、酸化ホルミウムフィルター、ディディミウムフィルターなど)で特定の吸収ピークを備えた既知の標準が使用されています。
* 手順:
*標準は分光光度計のビーム経路に配置されます。
*機器の波長は、最大吸光度が記録されるまで調整されます。
*次に、機器は標準のピークの既知の波長に較正されます。
* 重要性: 機器が使用する光の波長を測定に正確に識別することを保証します。
2。吸光度/透過率のキャリブレーション:
* 空白の使用: 空白は、測定されている分析物を除くサンプルのすべての成分を含むソリューションです。
* 手順:
*空白は分光光度計のビーム経路に配置されます。
*機器は、100%の透過率または0吸光度(機器に応じて)を読み取るように設定されています。
*これにより、後続のすべての測定のベースラインが設定されます。
* 重要性: このキャリブレーションステップは、目的の分析物ではないサンプル内の溶媒または他の成分によって引き起こされる吸収または透過率を修正します。
3。機器固有のキャリブレーション:
* キャリブレーション標準: 一部の分光光度計には、特定のキャリブレーション標準(例えば、既知の濃度の特定の分析物を持つ溶液)が必要です。
* 手順:
*分光光度計を使用して、標準の吸光度または透過率を測定します。
*これらの測定値を機器のソフトウェアに入力します。
*その後、機器は吸収または透過率を濃度に関連付けるキャリブレーション曲線を作成します。
* 重要性: 機器は、特定の分析物の吸光度または透過率の測定値を濃度測定に直接変換できるようにします。
追加のヒント:
* 通常のキャリブレーション: 頻繁なキャリブレーション(毎日または毎週)は、精度を維持するために不可欠です。
* 適切なメンテナンス: 楽器を清潔に保ち、ほこり、指紋、傷がないことは、最適なパフォーマンスに不可欠です。
* 高品質の標準と試薬の使用: キャリブレーションの精度は、使用される標準と試薬の品質に依存します。
* 温度制御: 一部の分光光度計には、正確な測定のために安定した温度環境が必要です。
注: 特定のキャリブレーション手順と周波数は、分光光度計モデルとその目的の使用によって異なる場合があります。詳細な手順については、常に機器のマニュアルを参照してください。