ウェスタンブロッティングの仕組み

ウェスタンブロッティングは、サンプル内の特定のタンパク質の検出に使用される分子生物学の手法です。 SDS-PAGE を使用してタンパク質をサイズに基づいて分離し、これらの分離されたタンパク質をメンブレンに転写します。この技術は、ブロット中の特定のタンパク質の標識に特異的な一次抗体を使用します。レポータータンパク質で標識された二次抗体は、標識されたタンパク質を一次抗体で検出します。

対象となる主な分野

1.ウェスタンブロッティングとは
– 定義、事実、応用
2.ウェスタンブロッティングの仕組み
– ウェスタンブロッティングのプロセス

重要な用語:発色、ニトロセルロース膜、一次抗体、二次抗体、ウェスタンブロッティング

ウェスタンブロッティングとは

ウェスタンブロッティングは、サンプル内の特定のタンパク質の検出に使用されるハイブリダイゼーション技術です。この技術は、目的のタンパク質の標識と抗体標識タンパク質の検出の両方に抗体を使用するため、イムノブロッティングとも呼ばれます。

図 1:ウェスタン ブロット

ウェスタンブロッティングは、1979 年に Towbin によって最初に開発され、現在、タンパク質分析の日常的な手法として使用されています。

ウェスタンブロッティングの仕組み

ウェスタンブロッティングは、主にサンプル中の特定のタンパク質の検出に使用されます。ウェスタンブロッティング技術の手順は以下に記載されています。

図 2:ウェスタンブロッティング – 手順

結論

ウェスタンブロッティングは、サンプル内の特定のタンパク質の存在を検出するために使用されるハイブリダイゼーション技術です。 SDS-PAGE を使用して、サイズと一次抗体との結合に基づいてタンパク質を分離します。これは、発色中に二次抗体によって認識されます。

参照:

1.「ウエスタンブロットの基本原則、ウエスタンブロットの仕組み」。 ボスター 、ここから入手できます。

画像提供:

1. 「抗リポ酸免疫ブロット」TimVickers – Commons Wikimedia 経由の自作 (CC BY-SA 3.0)
2. Cawang 著「Western Blotting」 – 自作、CC0) Commons Wikimedia 経由