主な違い フローサイトメトリーと FACS の違いは、フローサイトメトリーを使用すると、生細胞を含む不均一な液体混合物から多くのパラメーターに関連するデータを迅速、正確、かつ簡単に収集できることです。しかし、FACS (蛍光活性化セルソーティング) はフローサイトメトリーの派生物であり、細胞の異種混合物を異なる集団に物理的に選別することができます。 さらに、フローサイトメトリーは細胞の異なる光散乱特性を使用してデータを収集しますが、FACS は蛍光色素でタグ付けされた非常に特異的な抗体を使用して細胞タイプを区別します。さらに、フローサイトメトリーはセンサーを使用してデータを取得しますが、FACS は電磁石を使用してサンプルを分類します。
簡単に言うと、フローサイトメトリーと FACS は、異種混合物中の細胞のプロファイリングに使用される分析細胞生物学の 2 つの技術です。一般に、フローサイトメトリーは、混合集団内の細胞を選別することを含むFACSのさらなる分析技術として、細胞分析およびタンパク質発現の測定を含みます。
対象となる主な分野
1. フローサイトメトリーとは
– 定義、プロセス、重要性
2. FACS とは
– 定義、プロセス、重要性
3. フローサイトメトリーと FACS の類似点
– 共通機能の概要
4. フローサイトメトリーと FACS の違いは何ですか
– 主な相違点の比較
主な用語
活性化蛍光、FACS、フローサイトメトリー、異種細胞混合物、光散乱 
フローサイトメトリーとは
フローサイトメトリーは分析細胞生物学技術であり、異種混合物中の生細胞のさまざまなパラメーターを決定できます。また、最初のインピーダンスベースのフローサイトメトリー装置は、1953 年に Wallace H. Coulter によって発明されました。
- 細胞計数
- 細胞の特性と機能の決定
- 微生物の検出
- バイオマーカーの検出
- タンパク質工学の検出
- 血液がんなどの健康障害の診断
プロセス
さらに、流体中のいくつかのタイプの細胞を含むサンプルの懸濁液は、フローサイトメーターを通過することを可能にします。その中で、細胞は理想的にはレーザービームを介して一度に1細胞ずつ流れます。ここで、細胞タイプは、細胞タイプに固有の微分光散乱特性を示します。通常、これは、タンパク質、核酸含有量、細胞内成分、または細胞表面成分の発現差による可能性があります。
図 1:フローサイトメトリー
分析
さらに、フローサイトメトリーでは、さまざまなタイプの光散乱パターンと蛍光発光パターンが細胞タイプの分析に関与します。それらには、前方散乱光と側方散乱光、蛍光発光、マルチパラメトリック分析が含まれます。これらのうち、前方散乱光は細胞から屈折し、元の経路と同じ経路をたどります。また、細胞の大きさを検出するのにも役立ちます。一方、側方散乱光は、元の光路の外側にある方向に細胞から屈折します。したがって、それは異なる細胞型の粒度と複雑さを決定します。
さらに、適合する波長のレーザーで励起した後、細胞の蛍光分子が蛍光を発し、細胞のさまざまな構造の識別に役立ちます。それに加えて、蛍光色素または蛍光タグ付き抗体を使用して、細胞の特定の構造を標識することもできます。それとは別に、白血球の集団から前方散乱光と側方散乱光がプロットされ、顆粒球とリンパ球の特定の識別に役立ちます。
FACSとは
FACS (蛍光活性化セルソーティング) は、フローサイトメトリーの改良型です。 FACS の主な特徴は、異種混合物中の各細胞タイプを物理的に分離できることです。このため、この手法では、蛍光標識された標的特異的抗体を使用して、混合物中の特定の細胞タイプを識別します。したがって、FACS は異種細胞混合物をさらに 2 つの細胞型に分離します。その上、FACS は最初に Len Herzenberg によって発明されました。Len Herzenberg はその後、2006 年にその独創的な業績で 京都賞 を受賞しました。
図 2:FACS
重要性
さらに、細胞選別の主な重要性の 1 つは、表現型によって細胞を分離することです。したがって、これにより、その表現型に固有の核酸含有量、タンパク質発現、および代謝含有量を分析できます。第二に、幹細胞または CRISPR 細胞株の生成のために、健康で表現型が定義された細胞のコロニー生成に役立ちます。
プロセス
通常、FACS では、サンプルは振動ノズルを通って流れ、理想的には 1 つの細胞を含む液滴に流れを乱します。次に、これらの液滴は、電荷に基づいて細胞タイプを物理的に分類する帯電リングを通過します。
フローサイトメトリーと FACS の類似点
- フローサイトメトリーと FACS は、分析細胞生物学。
- 一般に、蛍光などの不均一な混合物中の異なる細胞タイプを検出するためのプロパティ。
- このために、セルの違いを使用します異なる細胞型の表面成分または細胞内成分。
- また、どちらの方法も前方散乱を収集します、側方散乱、および蛍光データ。
- さらに、どちらの手法も分子レベルで応用できます。生物学、遺伝学、免疫学、病理学、および医学。
フローサイトメトリーと FACS の違い
定義
フローサイトメトリーとは、細胞または染色体などの細胞内画分がレーザーを通過する際の光吸収または蛍光特性を検出することによる生体物質の分析を指します。ビーム。一方、FACS (蛍光活性化セルソーティング) は特殊なタイプのフローサイトメトリーを指し、特定の光散乱および蛍光に基づいて、生体細胞の異種混合物を一度に 1 セルずつ 2 つ以上の容器に分類する方法を提供します。それぞれの細胞の特徴。
対応
フローサイトメトリーは細胞生物学の分析技術ですが、FACS は特殊なタイプのフローサイトメトリーです。
結果
フローサイトメトリーは FACS に従いますが、FACS は不均一な細胞混合物の分析の最初のステップです。
意義
フローサイトメトリーには、FACS のさらなる分析手法として細胞分析とタンパク質発現の測定が含まれますが、FACS には混合集団内の細胞の選別が含まれます。
機能
フローサイトメトリーは、細胞の数、サイズ、核酸含有量などの細胞の特性を測定しますが、FACS は細胞を異種混合物から亜集団に分離します。
サンプリング方法
フローサイトメトリーは、細胞の異なる光散乱特性を使用してデータを収集しますが、FACS は、蛍光色素でタグ付けされた高度に特異的な抗体を使用して細胞タイプを識別します。
分析方法
フローサイトメトリーはセンサーを使用してデータを取得しますが、FACS は電磁石を使用してサンプルを分類します。
結論
要約すると、フローサイトメトリーは、異種混合物中の細胞の特性を決定する分析細胞生物学技術です。したがって、細胞の数、サイズ、および細胞の核酸含有量などを決定するのに役立ちます。また、混合物中の各細胞タイプに固有の細胞の異なる光散乱特性を使用します。一方、FACSは、異種混合物中の細胞を2つ以上のタイプに選別できるフローサイトメトリーの一種です。また、蛍光標識抗体を使用して、異なる細胞タイプの成分を特異的に識別します。したがって、FACS は、タンパク質発現アッセイにおけるフローサイトメトリーに続く最初の分析技術です。したがって、フローサイトメトリーと FACS の主な違いは、細胞の分化と機能の方法です。
参考文献:
1. ロビンソン、ライアン、ステファン・ペレンツ。 「ライアン・ロビンソンとステファン・ペレンツ」抗体、2013 年 12 月 6 日、こちらから入手可能。
2. 「フローサイトメトリー (FCM) /FACS |蛍光活性化セルソーティング (FACS)」。 Sino Biological、Sino Biological Inc.、こちらから入手可能。
画像提供:
1.「Cytometer」Kierano 著 – Commons Wikimedia による自作 (CC BY 3.0)
2. SariSabban (CC BY-SA 3.0) による「蛍光支援細胞選別 (FACS) B」、Commons Wikimedia 経由
