1。細胞溶解：
* セルを破る： これは、細胞膜と核膜が破壊されてDNAを放出する最初のステップです。
* 機械的方法： これらには、ブレンダー（より大きなサンプル用）の使用、超音波検査（音波を使用）、または細胞の粉砕（組織用）の使用が含まれます。
* 化学方法： 洗剤（SDSなど）または酵素（リゾチームなど）を使用して、細胞膜を分解します。
2。 DNA分離：
* DNAを他の細胞成分から分離： 溶解後、混合物にはDNA、タンパク質、脂質、およびその他の細胞破片が含まれています。
* 酵素消化： プロテイナーゼKのような酵素は、タンパク質を分解するために使用され、DNAを他の細胞成分からさらに分離します。
* 塩沈殿： 塩化ナトリウムなどの塩溶液を追加すると、DNAが溶液から沈殿する可能性がありますが、他の細胞成分は溶解したままです。
* 有機抽出： フェノールクロロホルムなどの有機溶媒を使用して、タンパク質や他の細胞成分からDNAを分離します。 DNAは水相のままで、他の成分は有機相に抽出されます。
3。 DNA精製：
* 汚染物質の除去： 分離後、DNAにはまだRNAやタンパク質などの不純物が含まれている可能性があります。
* エタノール沈殿： 溶液にエタノールを追加すると、DNAが沈殿し、さらに精製できます。
* 列クロマトグラフィー： DNAに結合する特定の樹脂を含む特殊なカラムを使用して、汚染物質の選択的除去を可能にします。
4。 DNAストレージ：
* 精製DNAの保存： 分離されたDNAは、長期使用のために特定の温度でバッファーに保存できます。
追加の考慮事項：
* 細胞のタイプ： 使用される方法は、研究されている細胞の種類に依存します。たとえば、細菌細胞は哺乳類細胞よりも溶解しやすいです。
* 必要なDNAの量： 必要なDNAの量は、選択した方法に影響します。
* ダウンストリームアプリケーション： DNAの使用（例：シーケンス、PCR、クローニング）には、特定の精製ステップが必要になる場合があります。
例：
血液からDNAを抽出する一般的な方法には、次のことが含まれます。
1。溶解： 血液は、洗剤と酵素を含む溶解緩衝液と混合して、細胞を開いてDNAを放出します。
2。タンパク質除去： プロテイナーゼKを添加してタンパク質を消化し、DNAをさらに分離します。
3。遠心分離： 混合物を遠心分離機で回転させて、DNAを他の細胞成分から分離します。
4。エタノール沈殿： エタノールを加えてDNAを沈殿させ、それを遠心分離によって収集します。
5。洗濯と保管： DNAペレットを洗浄して残りの汚染物質を除去し、バッファー溶液に保存します。
この簡素化された概要は、DNA抽出に伴う重要な手順を強調しています。特定の実験要件に応じて、これらの方法にはばらつきと最適化があります。
