歴史的に 、クロロホルムは、フェノールクロロホルム抽出の一部として使用されました 方法。これがどのように機能したかです:
* 細胞溶解: 最初のステップでは、DNAを放出するために細胞を開いて壊すことが含まれていました。
* フェノール: 次に、フェノールを混合物に加えました。フェノールは、タンパク質をDNAから分離する強力な変性剤です。
* クロロホルム: クロロホルムを追加して、二相系を作成しました 、形成された2つの層を意味します。最上層にはDNAの水溶液が含まれていましたが、下層にはフェノールと変性タンパク質が含まれていました。
クロロホルムが使用されなくなった理由:
* 安全性: クロロホルムは有毒で発がん性化合物であり、研究者に大きなリスクをもたらします。
* 効率: スピンカラムや磁気ビーズベースの抽出などの最新の方法は、フェノールクロロホルム法よりもはるかに高速で、簡単で、より安全です。これらの手法は、DNAを分離するためにさまざまな原則に依存しています。
クロロホルムの代わりに、最新のDNA抽出が使用します:
* バッファ: 緩衝液は、細胞を溶解し、他の細胞成分からDNAを分離するための右pHおよび塩濃度を作成するために使用されます。
* 酵素: プロテイナーゼKのような酵素は、タンパク質を消化するために使用され、DNAを他の細胞成分からさらに分離します。
* スピンカラムまたは磁気ビーズ: これらの材料はDNAに結合し、サンプルの残りの部分からの分離と精製を可能にします。
要約すると、クロロホルムはかつてDNA抽出に使用されていましたが、安全または効率的な方法とは見なされなくなりました。最新のDNA抽出技術は、より大きな安全性と容易さで同じ結果を達成するために代替方法を利用しています。